Name: السكتة الدماغية النمذجة في الفئران -- الشرق انسداد الشريان الدماغي مع نموذج الشعيرة (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-01-06T17:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 28 s
Description: تعلم تقنية انسداد الشريان الدماغي الأوسط بالشعيرة في الفئران لدراسة السكتة الدماغية الإقفارية. تُستخدم هذه الطريقة غير الباضعة لتقييم العجز العصبي والموت الخلوي العصبي.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

وقد تم تمويل هذا العمل عن طريق برنامج الاتحاد الأوروبي الإطاري السابع (FP7/2007-2013) بموجب اتفاق منحة رقم 201024 ورقم 202213 (الشبكة الأوروبية السكتة الدماغية). وقدم تمويل إضافي من قبل الفراء Bundesministerium الإضافية اطلعوا اوند Bildung (مركز أبحاث السكتة الدماغية في برلين) ، وجمعية الألمانية للبحوث (Exzellenzcluster NEUROCURE). فإن الكتاب أود أن أشكر Mareike Thielke (الإعالة التجريبي للأعصاب ، شاريتيه برلين) للدعم خلال العملية وإلكه لودفيغ (خدمات الفيديو شاريتيه) لإنتاج الرسوم المتحركة.

لضمان جودة عالية واستنساخ ، نوصي استخدام إجراءات التشغيل الموحدة (سوب). في هذا الفيديو ، ويتم تطبيق إجراءات العمل الموحدة كما نشرت المتقدمة واستخدامها في المختبر لدينا. 1 1. انسداد الشريان الدماغي الأوسط <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الفئران هي مخدرة مع النظام مخدر المناسبة في التشاور مع الموظفين البيطريين. (مثلا التعريفي مع 1.5 -- 2 ٪ Isoflurane والصيانة مع 1.0 -- 1.5 ٪ في Isoflurane N2O 03/02 و 1 / 3 O2 باستخدام المرذاذ). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم الاحتفاظ درجة حرارة الجسم من الفئران على 36،5 درجة مئوية ± 0.5 درجة مئوية أثناء الجراحة مع لوحة التدفئة. ينصح بشدة ردود الفعل وسادة التدفئة للرقابة ، الذي يدفئ وفقا لدرجة حرارة المستقيم من الفأرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطهير الجلد والفرو المحيطة بها مع وكيل المناسب (مثل الكحول الإيثيلي 70 ٪) وجففها بعد ذلك. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم إجراء شق الرقبة خط الوسط ويتم سحبها في الأنسجة اللينة إربا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم تشريح بعناية الشريان السباتي الأيسر الشائع (LCCA) خالية من الأعصاب المحيطة (ودون الإضرار بمصالح العصب المبهم) ويتم إجراء ضمد به 6.0/7.0 السلسلة. ويمكن أيضا أن تستخدم 5.0 السلسلة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم يتم فصل الشريان السباتي الأيسر الخارجية (LECA) ويتم إجراء العقدة الثانية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المقبل ، يتم عزل الشريان السباتي الأيسر الداخلية (LICA) ومستعدة عقدة مع خيوط 6.0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد الحصول على عرض جيد من الشريان السباتي الداخلي اليسار (LICA) والشريان الأيسر جناحية (LPA) ، يتم قص كلا الشرايين والاوعية الدموية الدقيقة باستخدام قصاصة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم قطع ثقب صغير في LCCA معروضا bifurcates إلى LECA وLICA و. ومن ثم قدم وحيدة المصنوعة من النايلون 8،0 المغلفة مع خليط تصليب السيليكون (أنظر أدناه) في LICA ، حتى أنه يتوقف عند مقطع. الاهتمام يجب أن يدفع بعدم دخول الشريان القذالي. (الشكل 1) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم فتح الشرايين في حين قص يتم إدراج خيوط في LICA لتسد أصل LMCA في دائرة ويليس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إغلاق العقدة الثالثة على LICA لإصلاح خيوط في الموقف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الفئران تلقي المالحة 0،5 مل تحت الجلد وتجديد وحدة التخزين. لتخفيف الألم ، ويطبق موضعيا يدوكائين هلام في الجرح. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا كان المقصود ضخه والفئران البقاء لمدة 30-90 دقيقة انسداد في قفص ساخنة ، قد تكون مغلقة على الجرح مع مقطع خياطة صغيرة. بعد ذلك ، يتم تنفيذ عملية التخدير الثانية ، والثالثة على عقدة ICA هو لحظة فتح وسحب خيوط. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم تقصير الخيوط المتبقية ويتم تكييفها مع الجلد خياطة جراحية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جميع الحيوانات الحصول على تجديد الجزء الثاني كما هو موضح أعلاه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم وضع الحيوانات في قفص ساخن لمدة ساعتين للسيطرة على درجة حرارة الجسم. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يجب فحص الحيوانات يوميا بعد عملية جراحية لعلامات الانزعاج. يمكن أن تظهر بعض الفئران آخر وفقدان الوزن الجراحية. انهم يحصلون على غذاء المهروسة في طبق بتري ، وضعت على الأرض لتشجيع تناول الطعام. يتم استبدال المواد الغذائية يوميا لمدة سبعة أيام. </li></ol></li></ol> 2. عملية صورية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لعمليات صورية يتم إدراج خيوط لتسد LMCA وسحبت على الفور للسماح ضخه الفورية (1.8). العملية اللاحقة مطابقة لتلك التي أجريت على الحيوانات تمر نقص الأوكسجين الدماغي (1،9-1،14) بما في ذلك تخدير الثانية. </li></ol> 3. إعداد الشعيرة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وينبغي النظر في عقم للخيوط. استخدام معدات معقمة وكذلك التعامل مع المناسبة من خيوط وبعد ذلك شرطا أساسيا لعملية جراحية معقمة. التطهير من خيوط أمر صعب ، لأن العديد من الأساليب الشائعة التعقيم قد تسوء نوعية خيوط. لكن أساليب مثل الإشعاع ، على سبيل المثال مع ضوء الأشعة فوق البنفسجية أو الأشعة γ ، أو التعقيم الكيميائي ، على سبيل المثال مع غازات شديدة التفاعل مثل أكسيد الإثيلين ، قابلة للتطبيق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تقطع خيوط النايلون 8،0 في أطوال 11 ملم تحت المجهر </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يجب أن تكون مغلفة طرف الخيط تماما وبالتساوي على طول 8 ملم مع خليط من تصليب Xantopren M الغشاء المخاطي والمنشط Optosil NF </li></ol> 4. ممثل النتائج اعتمادا على مدة تقييد تدفق الدم ، والحركية المختلفة والسلوكية نتيجة العجز. على حد سواء بعد 30 و 60 دقيقة من نقص الأوكسجين الدماغي ، والحيوانات في معظم الحالات تظهر انخفاض المقاومة لدفع الأطراف وتدور بسبب اضطراب في الحركة. أخف تتظاهر الآفات موقفا المثنية في الجبهة لىMBS. ويمكن استخدام هذه العلامات يمكن ملاحظتها بسهولة على درجة الأساسية لنجاح العملية. 2 يمكن أن يكون شكليا المقررة الآفة باستخدام الأنسجة أو التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI). ستون دقيقة انسداد الشريان الدماغي الأوسط تنتج pannecrosis الأنسجة في المنطقة بما في ذلك المخطط والقشرة المخية الحديثة على حد سواء ، وبينما 30 دقيقة من نقص الأوكسجين يسبب موت الخلايا العصبية أساسا تقتصر على المخطط. 3 (الشكل 2) ومن حيث حجم احتشاء ، ونحن نتوقع الانحراف المعياري أقل من 30 ٪ في مجموعة من العمليات. وفيات يعتمد على الوقت مع إطباق نحو 5 ٪ بعد 30 دقيقة من نقص الأوكسجين و 10 -- 20 ٪ بعد 60 دقيقة. احتمال آخر الغازية الحد الأدنى هو استخدام الليزر دوبلر flowmetry (LDF) خلال العملية ، التي تسمح للسيطرة المباشرة من نجاحه. في حيوان الفردية ، والحد إلى 10 -- 20 ٪ من قيم preocclusion يشير بوضوح تحريض الناجح لنقص التروية الدماغية الوصل 4 ومع ذلك ، لا يمكن LDF أن تستخدم كوسيلة لإجراء مقارنات بين الأفراد ، منذ LDF يمكن قياس فقط التغيرات الكمية (بالنسبة المئوية) من الدم. تدفق داخل نسيج عينة صغيرة الحجم ومحدودة. أنها لا تعطي معلومات عن مدى المكاني للحد من تدفق الدم. 5 هناك عدة اختبارات لتقييم الجوانب السلوكية بعد السكتة الدماغية ، بما في ذلك تحليل مشية 6،7 ، Rotarod 8 ، 9،10 القطب اختبار لاصقة اختبار إزالة 11،12 ، 13،14 اختبار الدرج ، سلم اختبار درجة 15،16 وموريس متاهة مائية 17. في كل هذه التجارب ، والفئران التعرض للMCAo أداء أقل من الحيوانات بنجاح السيطرة. <img src="/files/ftp_upload/2423/2423fig1.jpg" alt="الشكل 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="الشكل 1"> الشكل 1. مخطط للهيكل السفينة التي تغذي الدماغ (كما هو مبين في الخلفية) في الماوس. سلالات مختلفة قد تظهر الاختلافات ، وعلى سبيل المثال الشريان القذالي يترك أحيانا من الشريان السباتي الداخلي. <img src="/files/ftp_upload/2423/2423fig2.jpg" alt="الشكل 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="الشكل 2"> الشكل 2. توضيح تخطيطي من أحجام الآفة النموذجية بعد نقطة زمنية مختلفة من ضخه في النموذج MCAo القريبة. في الوسط ، وصفت مسار نموذجي من النشاط الدماغي وظيفية وتدفق الدم بعد MCAo. (MCAo : الشرق الدماغي انسداد الشريان ، LDF : ليزر لقياس تدفق دوبلر)

<ol><li>Dirnagl, U. Members of the MCAO-SOP Group. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standard+operating+procedures+%28SOP%29+in+experimental+stroke+research%3A+SOP+for+middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Precedings%22%5BJournal%5D)">Standard operating procedures (SOP) in experimental stroke research: SOP for middle cerebral artery occlusion in the mouse.</a> Nature Precedings. , (2010).</li>
<li>Bederson, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+middle+cerebral+artery+occlusion%3A+evaluation+of+the+model+and+development+of+a+neurologic+examination%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Rat middle cerebral artery occlusion: evaluation of the model and development of a neurologic examination.</a> Stroke. 17, 472-476 (1986).</li>
<li>Katchanov, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+neuronal+vulnerability+following+mild+focal+brain+ischemia+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Pathol%22%5BJournal%5D)">Selective neuronal vulnerability following mild focal brain ischemia in the mouse.</a> Brain Pathol. 13, 452-464 (2003).</li>
<li>Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDirnagl%2C+U+%22Complexities%2C+Confounders%2C+and+Challenges+in+Experimental+Stroke+Research%3A+A+checklist+for+researchers+and+reviewers+in+Rodent+models+of+stroke%22">Complexities, Confounders, and Challenges in Experimental Stroke Research: A checklist for researchers and reviewers in Rodent models of stroke</a>. Dirnagl, U. , Springer. New York Dordrecht Heidelberg London. 267-267 (2010).</li>
<li>Dirnagl, U., Kaplan, B., Jacewicz, M., Pulsinelli, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous+measurement+of+cerebral+cortical+blood+flow+by+laser-Doppler+flowmetry+in+a+rat+stroke+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Continuous measurement of cerebral cortical blood flow by laser-Doppler flowmetry in a rat stroke model.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 9, 589-596 (1989).</li>
<li>Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comprehensive+analysis+of+gait+impairment+after+experimental+stroke+and+the+therapeutic+effect+of+environmental+enrichment+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">A comprehensive analysis of gait impairment after experimental stroke and the therapeutic effect of environmental enrichment in rats.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 28, 1936-1950 (2008).</li>
<li>Lubjuhn, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+testing+in+a+mouse+stroke+model+induced+by+occlusion+of+the+distal+middle+cerebral+artery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Functional testing in a mouse stroke model induced by occlusion of the distal middle cerebral artery.</a> J Neurosci Methods. 184, 95-103 (2009).</li>
<li>Jones, B. J., Roberts, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+quantiative+measurement+of+motor+inco-ordination+in+naive+mice+using+an+acelerating+rotarod%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">The quantiative measurement of motor inco-ordination in naive mice using an acelerating rotarod.</a> J Pharm Pharmacol. 20, 302-304 (1968).</li>
<li>Matsuura, K., Kabuto, H., Makino, H., Ogawa, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pole+test+is+a+useful+method+for+evaluating+the+mouse+movement+disorder+caused+by+striatal+dopamine+depletion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Pole test is a useful method for evaluating the mouse movement disorder caused by striatal dopamine depletion.</a> J Neurosci Methods. 73, 45-48 (1997).</li>
<li>Bouet, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensorimotor+and+cognitive+deficits+after+transient+middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Sensorimotor and cognitive deficits after transient middle cerebral artery occlusion in the mouse.</a> Exp Neurol. 203, 555-567 (2007).</li>
<li>Freret, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+administration+of+deferoxamine+reduces+brain+damage+and+promotes+functional+recovery+after+transient+focal+cerebral+ischemia+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Delayed administration of deferoxamine reduces brain damage and promotes functional recovery after transient focal cerebral ischemia in the rat.</a> Eur J Neurosci. 23, 1757-1765 (2006).</li>
<li>Modo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurological+sequelae+and+long-term+behavioural+assessment+of+rats+with+transient+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Neurological sequelae and long-term behavioural assessment of rats with transient middle cerebral artery occlusion.</a> J Neurosci Methods. 104, 99-109 (2000).</li>
<li>Montoya, C. P., Campbell-Hope, L. J., Pemberton, K. D., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+%22staircase+test%22%3A+a+measure+of+independent+forelimb+reaching+and+grasping+abilities+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">The "staircase test": a measure of independent forelimb reaching and grasping abilities in rats.</a> J Neurosci Methods. 36, 2-3 (1991).</li>
<li>Baird, A. L., Meldrum, A., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+staircase+test+of+skilled+reaching+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Bull%22%5BJournal%5D)">The staircase test of skilled reaching in mice.</a> Brain Res Bull. 54, 243-250 (2001).</li>
<li>Metz, G. A., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cortical+and+subcortical+lesions+impair+skilled+walking+in+the+ladder+rung+walking+test%3A+a+new+task+to+evaluate+fore-+and+hindlimb+stepping%2C+placing%2C+and+co-ordination%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Cortical and subcortical lesions impair skilled walking in the ladder rung walking test: a new task to evaluate fore- and hindlimb stepping, placing, and co-ordination.</a> J Neurosci Methods. 115, 169-179 (2002).</li>
<li>Farr, T. D., Liu, L., Colwell, K. L., Whishaw, I. Q., Metz, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bilateral+alteration+in+stepping+pattern+after+unilateral+motor+cortex+injury%3A+a+new+test+strategy+for+analysis+of+skilled+limb+movements+in+neurological+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Bilateral alteration in stepping pattern after unilateral motor cortex injury: a new test strategy for analysis of skilled limb movements in neurological mouse models.</a> J Neurosci Methods. 153, 104-113 (2006).</li>
<li>Morris, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developments+of+a+water-maze+procedure+for+studying+spatial+learning+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Developments of a water-maze procedure for studying spatial learning in the rat.</a> J Neurosci Methods. 11, 47-60 (1984).</li>
<li>Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+studies+of+ischemic+brain+edema.+I%3A+a+new+experimental+model+of+cerebral+embolism+in+rats+in+which+recirculation+can+be+introduced+in+the+ischemic+area%5BTitle%5D)+AND+%22Jpn+J+Stroke%22%5BJournal%5D)">Experimental studies of ischemic brain edema. I: a new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area.</a> Jpn J Stroke. 8, 1-8 (1986).</li>
<li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20, 84-91 (1989).</li>
<li>Endres, M., Dirnagl, U. Neuroprotective Strategies in Animal and in vitro-Models of Neuronal Damage: Ischemia and Stroke. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aEndres%2C+M+%22Molecular+and+Cellular+Biology+of+Neuroprotection+in+the+CNS%22">Molecular and Cellular Biology of Neuroprotection in the CNS</a>. Alzheimer, C. , Kluver Academic and Landes Bioscience. New York. Vol. 513 455-474 (2003).</li>
<li>Dirnagl, U., Iadecola, C., Moskowitz, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathobiology+of+ischaemic+stroke%3A+an+integrated+view%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Pathobiology of ischaemic stroke: an integrated view.</a> Trends Neurosci. 22, 391-397 (1999).</li>
<li>Liu, S., Zhen, G., Meloni, B. P., Campbell, K., Winn, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+Stroke+Model+Guidelines+for+Preclinical+Stroke+Trials+%281st+Edition%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Stroke+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Rodent Stroke Model Guidelines for Preclinical Stroke Trials (1st Edition).</a> J Exp Stroke Transl Med. 2, 2-27 (2009).</li>
<li>Chen, Y., Ito, A., Takai, K., Saito, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blocking+pterygopalatine+arterial+blood+flow+decreases+infarct+volume+variability+in+a+mouse+model+of+intraluminal+suture+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Blocking pterygopalatine arterial blood flow decreases infarct volume variability in a mouse model of intraluminal suture middle cerebral artery occlusion.</a> J Neurosci Methods. 174, 18-24 (2008).</li>
<li>Tsuchiya, D., Hong, S., Kayama, T., Panter, S. S., Weinstein, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+suture+size+and+carotid+clip+application+upon+blood+flow+and+infarct+volume+after+permanent+and+temporary+middle+cerebral+artery+occlusion+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Effect of suture size and carotid clip application upon blood flow and infarct volume after permanent and temporary middle cerebral artery occlusion in mice.</a> Brain Res. 970, 1-2 (2003).</li>
<li>Beckmann, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+resolution+magnetic+resonance+angiography+non-invasively+reveals+mouse+strain+differences+in+the+cerebrovascular+anatomy+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">High resolution magnetic resonance angiography non-invasively reveals mouse strain differences in the cerebrovascular anatomy in vivo.</a> Magn Reson Med. 44, 252-258 (2000).</li>
<li>Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+strain+differences+in+susceptibility+to+cerebral+ischemia+are+related+to+cerebral+vascular+anatomy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Mouse strain differences in susceptibility to cerebral ischemia are related to cerebral vascular anatomy.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 13, 683-692 (1993).</li>
<li>Florian, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+hypothermia+reduces+infarct+volume+in+aged+rats+after+focal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Long-term hypothermia reduces infarct volume in aged rats after focal ischemia.</a> Neurosci Lett. 438, 180-185 (2008).</li>
<li>Noor, R., Wang, C. X., Shuaib, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+hyperthermia+on+infarct+volume+in+focal+embolic+model+of+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Effects of hyperthermia on infarct volume in focal embolic model of cerebral ischemia in rats.</a> Neurosci Lett. 349, 130-132 (2003).</li>
<li>Barber, P. A., Hoyte, L., Colbourne, F., Buchan, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature-regulated+model+of+focal+ischemia+in+the+mouse%3A+a+study+with+histopathological+and+behavioral+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Temperature-regulated model of focal ischemia in the mouse: a study with histopathological and behavioral outcomes.</a> Stroke. 35, 1720-1725 (2004).</li>
<li>Shin, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mild+induced+hypertension+improves+blood+flow+and+oxygen+metabolism+in+transient+focal+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Mild induced hypertension improves blood flow and oxygen metabolism in transient focal cerebral ischemia.</a> Stroke. 39, 1548-1555 (2008).</li>
<li>Bottiger, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+cerebral+ischemia+due+to+cardiocirculatory+arrest+in+mice+causes+neuronal+degeneration+and+early+induction+of+transcription+factor+genes+in+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Mol+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Global cerebral ischemia due to cardiocirculatory arrest in mice causes neuronal degeneration and early induction of transcription factor genes in the hippocampus.</a> Brain Res Mol Brain Res. 65, 135-142 (1999).</li>
<li>Kapinya, K. J., Prass, K., Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isoflurane+induced+prolonged+protection+against+cerebral+ischemia+in+mice%3A+a+redox+sensitive+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreport%22%5BJournal%5D)">Isoflurane induced prolonged protection against cerebral ischemia in mice: a redox sensitive mechanism.</a> Neuroreport. 13, 1431-1435 (2002).</li>
<li>Endres, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+stroke+protection+by+physical+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Neurol%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of stroke protection by physical activity.</a> Ann Neurol. 54, 582-590 (2003).</li>
<li>Gertz, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physical+activity+improves+long-term+stroke+outcome+via+endothelial+nitric+oxide+synthase-dependent+augmentation+of+neovascularization+and+cerebral+blood+flow%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Physical activity improves long-term stroke outcome via endothelial nitric oxide synthase-dependent augmentation of neovascularization and cerebral blood flow.</a> Circ Res. 99, 1132-1140 (2006).</li>
<li>Richter, S. H., Garner, J. P., Wurbel, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+standardization%3A+cure+or+cause+of+poor+reproducibility+in+animal+experiments%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Environmental standardization: cure or cause of poor reproducibility in animal experiments.</a> Nat Methods. 6, 257-261 (2009).</li>
<li>Liesz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+spectrum+of+systemic+immune+alterations+after+murine+focal+ischemia%3A+immunodepression+versus+immunomodulation%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">The spectrum of systemic immune alterations after murine focal ischemia: immunodepression versus immunomodulation.</a> Stroke. 40, 2849-2858 (2009).</li>
<li>Meisel, C., Schwab, J. M., Prass, K., Meisel, A., Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+nervous+system+injury-induced+immune+deficiency+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Central nervous system injury-induced immune deficiency syndrome.</a> Nat Rev Neurosci. 6, 775-786 (2005).</li>
<li>Engel, O., Meisel, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+of+Infection+Before+and+After+Stroke%3A+Investigating+New+Targets%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Disord+Drug+Targets%22%5BJournal%5D)">Models of Infection Before and After Stroke: Investigating New Targets.</a> Infect Disord Drug Targets. 9, (2010).</li>
<li>Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bench+to+bedside%3A+the+quest+for+quality+in+experimental+stroke+research%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Bench to bedside: the quest for quality in experimental stroke research.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 26, 1465-1478 (2006).</li>
<li>Macleod, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Good+laboratory+practice%3A+preventing+introduction+of+bias+at+the+bench%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Good laboratory practice: preventing introduction of bias at the bench.</a> Stroke. 40, 50-52 (2009).</li>
<li>Group, S. T. A. I. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+standards+regarding+preclinical+neuroprotective+and+restorative+drug+development%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Recommendations for standards regarding preclinical neuroprotective and restorative drug development.</a> Stroke. 30, 2752-2758 (1999).</li>
</ol>

وقد أجريت تجارب على الحيوانات وفقا للمبادئ التوجيهية واللوائح التي وضعتها fuer Landesamt Soziales اوند Gesundheit ، برلين ، ألمانيا.

قدم نموذج عابرة ، انسداد MCA القريبة 18،19 يحاكي هنا واحدة من الأنواع الأكثر شيوعا من السكتات الدماغية في المرضى. 20 واستنادا مرات ضخه متغير ، ويقدم نموذجا درجات مختلفة من الضرر تتراوح بين هجوم نقص تروية عابرة (TIA) إلى الكبيرة عوائق بما في ذلك أجزاء كبيرة من نصف الكرة الدماغية. وهذا يسمح للباحث لدراسة الآليات الفيزيولوجية المرضية المختلفة بعد السكتة الدماغية. 20،21 يمكن إجراء عملية جراحية في فترة زمنية قصيرة ، وتنتج الآفات استنساخه للغاية. ومع ذلك ، وهذا يتطلب مراقبة دقيقة من الإرباك 22 الفروق الصغيرة في تقنية العملية قد تكون مسؤولة عن تأثيرات مختلفة على احتشاء. 23،24 وعلاوة على ذلك ، ويرجع ذلك إلى الفروق في تشريح الأوعية الدموية الدماغية ، وسلالات مختلفة الماوس تظهر نتائج مختلفة. 25،26 الهيئة درجة الحرارة يؤثر على الجهاز العصبي الضرر ، مع انخفاض درجة الحرارة يؤدي إلى آفات أصغر 27 و ارتفاع الحرارة إلى عجز أشد (28). بالتالي التحكم في درجة الحرارة ، والصيانة ذات الصلة للغاية في هذا النموذج (29). بالإضافة إلى ذلك ، ضغط الدم وغازات الدم والإرباك هاما من نتائج ، وتحتاج إلى يتم رصدها. ينصح 30،31 استخدام طرق سريعة والغازية الحد الأدنى (غير الغازية قياس ضغط الدم ، ومناسبة وسهلة الوصول إلى مواقع جمع الدم). اختيار مخدر المهم أيضا للغاية ، كما أن البعض قد يكون لها آثار اعصاب ، و / أو أن تكون موسعات ، وعلى سبيل المثال Isoflurane 32 وبالتالي ، ينبغي أن يكون التعرض للتخدير أن تكون قصيرة قدر الإمكان وموحدة. استثنينا الحيوانات التي خضعت لعملية جراحية لمدة أطول من 15 دقيقة. حلق موقع الجراحية تنتج microabrasions والالتهابات والنشرات شظايا الشعر. هذا قد زيادة الالتهاب وتعزيز العدوى المحلية ، والتي قد تؤثر على فيزيولوجيا السكتة الدماغية. قد ظروف السكن ، وبخاصة استخدام التخصيب ، تؤثر نتائج السكتة الدماغية ، وينبغي أن تكون موحدة وصفها في التقارير البحثية. 6،33،34 استخدام تخصيب البيئية وتأثيرها على استنساخ هو موضوع نقاش (35). المحير الآخر المهم هو السكتة الدماغية الناجمة عن مخاطر الإصابة خاصة بعد أوقات أطول من نقص الأوكسجين 36 ، الأمر الذي يؤدي إلى اعتلال إضافية وزيادة معدل الوفيات. 37،38 أما أعراض العدوى أصبحت اليوم في حوالي 3-5 ، وهذا له آثار مهمة على المدى الطويل في متابعة مثل هذه النماذج. لتحقيق نتائج ذات الصلة لوضع استراتيجيات علاجية جديدة لتوحيد المقاييس ومراقبة الجودة والسكتة الدماغية مهم للغاية في مجال البحوث قبل السريرية متعدية السكتة الدماغية 39 &quot;الممارسة المعملية الجيدة&quot; 40،41 ولايات : <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وصفا مفصلا لمناسبة والحيوانات المستخدمة ؛ </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب حجم العينة وإعداد التقارير عن حجم التأثير المتوقع ؛ </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج معايير والإقصاء ، التي أنشئت قبل الدراسة ؛ </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التوزيع العشوائي للتوزيع إلى مجموعات ؛ </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إخفاء التخصيص بالنسبة للمحققين ؛ </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الإبلاغ عن الحيوانات المستبعدة من التحليل ؛ </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أعمى تقييم نتائج ؛ </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الإبلاغ عن احتمال تضارب المصالح وتمويل الدراسة. </li></ol>

<table><tbody><tr><td>مقص جراحي (لقص الجلد)</td><td>Fine Science Tools</td><td>14028-10</td><td></td></tr><tr><td>2 ملقط Dumont (طرف مستقيم طبي #5)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11253-20</td><td></td></tr><tr><td>مقص زنبركي (وفقاً لـ Vannas)</td><td>Fine Science Tools</td><td>15000-00</td><td></td></tr><tr><td>ملقط تثبيت للمشابك الدقيقة</td><td>Fine Science Tools</td><td>00072-14</td><td></td></tr><tr><td>مشبك وعائي دقيق (مثلاً S&amp;amp;G B1-V)</td><td>Fine Science Tools</td><td>00396-01</td><td>يمكن استخدام Serrefine أيضاً</td></tr><tr><td>2 ملقط مرقئ وفقاً لـ Hartmann</td><td>Fine Science Tools</td><td>13002-10</td><td></td></tr><tr><td>حامل إبر (وفقاً لـ Olsen-Hegar أو غيره)</td><td>Fine Science Tools</td><td>12002-14</td><td></td></tr><tr><td>ملقط تشريحي قياسي (لإغلاق الجرح)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11000-12</td><td></td></tr><tr><td>خيوط جراحية 5/0</td><td>Suprama</td><td></td><td>لأربطة الأوعية الدموية</td></tr><tr><td>خيوط جراحية 6/0</td><td>Suprama</td><td></td><td>لخياطة الجلد، ويمكن استخدام 5/0 أيضاً</td></tr><tr><td>ليدوكائين (مثلاً Xylocain Gel 2%)</td><td>AstraZeneca</td><td></td><td>أو أي مسكن آلام موضعي آخر</td></tr><tr><td>مجهر تشريحي (مجهر ستيريو)، تكبير من 6x إلى بحد أقصى 40x</td><td>Leica Zeiss</td><td>MZ6 Stemi2000C</td><td></td></tr><tr><td>مصدر ضوء بارد</td><td>Leica Microsystems</td><td>KL1500</td><td></td></tr><tr><td>نظام وسادة تدفئة يتم التحكم به عبر التغذية الراجعة لدرجة الحرارة</td><td>Fine Science Tools</td><td>21052-00</td><td>مع وسادة للفئران ومسبار صغير</td></tr><tr><td>نظام تخدير للإيزوفلوران</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>إيزوفلوران</td><td>Abott</td><td></td><td></td></tr><tr><td>غرفة إفاقة بيطرية</td><td>Peco Services</td><td>V1200</td><td>قفص مدفأ</td></tr><tr><td>خيط نايلون 8.0</td><td>Suprama</td><td>TEL181005</td><td>للتغليف</td></tr><tr><td>مشرط</td><td></td><td></td><td>لقص الخيط إلى قطع</td></tr><tr><td>مسطرة</td><td></td><td></td><td>لقص الطول الصحيح من الخيط</td></tr><tr><td>Xantopren M Mucosa</td><td>Heraeus Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Activator Universal Plus</td><td>Heraeus Instruments</td><td></td><td>Optosil - Xantopren</td></tr><tr><td>2 ملقط Dumont (طرف مستقيم طبي #5)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11253-20</td><td></td></tr><tr><td>طبقة تحتية ناعمة لتخزين والإمساك بالخيوط غير المغلفة</td><td></td><td></td><td>مثلاً مسحات قطنية، رغوة، &amp;#8230;</td></tr><tr><td>وعاء للخيوط الجديدة المصنعة</td><td></td><td></td><td>مثلاً أطباق بتري، رغوة مرنة، &amp;#8230;</td></tr></tbody></table>

السكتة الدماغية النمذجة في الفئران -- الشرق انسداد الشريان الدماغي مع نموذج الشعيرة

Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

السكتة الدماغية هي من بين الأسباب الأكثر شيوعا للوفاة والعجز الكبار ، لا سيما في البلدان المتقدمة للغاية. ومع ذلك ، وخيارات العلاج حتى الآن محدودة للغاية. لتلبية الحاجة إلى نهج العلاجية الرواية ، والسكتة الدماغية البحوث التجريبية توظف كثيرا من النماذج من نقص الأوكسجين الدماغي القوارض التنسيق. معظم الباحثين استخدام إطباق دائمة أو مؤقتة من الشريان الدماغي الأوسط (MCA) في الفئران أو الجرذان. انسداد الشرايين القريبة من الدماغ المتوسط ​​(MCA) من خلال تقنية خياطة داخل اللمعة (ما يسمى خيوط الدرز أو النموذج) هو على الارجح النموذج الأكثر استخداما في البحوث التجريبية السكتة الدماغية. نموذج MCAO داخل اللمعة يوفر ميزة على إحداث نقص الأوكسجين عابرة أو استنساخه الدائم للأراضي MCA نسبيا بطريقة غير الغازية. النهج داخل اللمعة يقطع تدفق الدم في كامل أراضي هذا الشريان. خيوط بالتالي انسداد تدفق الاعتقالات الأقرب إلى الشرايين lenticulo - المخططية ، التي تمد العقد القاعدية. خيوط يمكن انسداد نتائج MCA في الآفات استنساخه في القشرة والمخطط وتكون إما دائمة أو عابرة. في المقابل ، حمل نماذج البعيدة (لالمتفرعة من الشرايين lenticulo - المخططية) MCA إطباق الغيار عادة المخطط ينطوي في المقام الأول والقشرة المخية الحديثة. بالإضافة هذه النماذج لا تتطلب قطع القحف. في النموذج أظهر في هذه المقالة ، يتم إدخال خيوط السيليكون مغلفة في الشريان السباتي المشترك ومتقدمة على طول الشريان السباتي الداخلي في دائرة ويليس ، حيث كتل منشأ الشريان الدماغي الأوسط. في المرضى ، وانسداد الشريان الدماغي الأوسط هي من بين الأسباب الأكثر شيوعا من السكتات الدماغية. يمكن أن يتم اختياره منذ فترات متفاوتة الدماغية بحرية في هذا النموذج بالاعتماد على نقطة للمرة ضخه ، والآفات الدماغية بدرجات متفاوتة من الشدة يمكن أن تنتجه. ضخه من قبل إزالة خيوط الإطباق على الأقل جزئيا نماذج استعادة تدفق الدم بعد تحلل (طن سنويا) عفوية أو العلاجية لجلطة انصمامية في البشر. في هذا الفيديو سوف نقدم هذه التقنية الأساسية فضلا عن المزالق الكبرى والإرباك الذي قد يحد من القيمة التنبؤية لهذا النموذج.

الخيطية انسداد الشريان الدماغي الأوسط هو نموذج مشترك لدراسة السكتة الدماغية لدى الفئران.

تعد السكتة الدماغية من أكثر أسباب الوفاة والعجز لدى البالغين شيوعاً، لا سيما في البلدان المتقدمة. ومع ذلك، فإن خيارات العلاج المتاحة حتى الآن...

الهدف العام من هذا الإجراء هو إنتاج نموذج فأر لنقص التروية الدماغية البؤري عن طريق سد الشريان الدماغي الأوسط باستخدام خيط داخل اللمعة. يتم تحقيق ذلك عن طريق إجراء شق في خط منتصف الرقبة وتحديد الشريان السباتي المشترك. الخطوة التالية هي ربط الشريان السباتي المشترك، مع استخدام مشابك الشريان السباتي الخارجي لتثبيتها في مكانها ومنع حدوث نزيف.تتمثل الخطوة النهائية من الإجراء في إدخال الفتيلة إلى دائرة ويليس. يؤدي ذلك إلى سد فرع الشريان المخي المتوسط، مما ينتج عنه في النهاية قصور عصبي. ونتيجة لذلك، يمكن تحديد حدوث الانسداد من خلال ملاحظة التغيرات في السلوك.تتمثل إحدى المزايا الرئيسية لانسداد الشريان المخي المتوسط (MCA) القريب عبر تقنية الخيط في أنها توفر آفات عالية التكرار في الطبقة المخططة وفي القشرة المخية. ويمكن تطبيق نقص التروية بشكل دائم أو مؤقت، وعلاوة على ذلك، بما أنها لا تتطلب عملية استئصال القحف، يمكن اعتبار انسداد الشريان المخي المتوسط عن طريق الخيط غير جراحية إلى حد ما. وبشكل عام، يواجه الأفراد المبتدئون في هذه الطريقة صعوبة بسبب الطبيعة الدقيقة للتقنيات الجراحية المجهرية. قبل البدء بالإجراء، قم بتجهيز الخيط عن طريق قطع خيط نايلون 8.0 إلى أطوال تبلغ 11 مليمتر تحت المجهر.يجب تغطية طرف الفتيلة بالكامل وبشكل متجانس على طول ثمانية مليمترات بخليط من السيليكون، ويُنصح باتباع إجراءات التشغيل القياسية لتحقيق أفضل النتائج. يعتمد نوع الفأر المستخدم على الهدف من الدراسة، وبوجه عام، يجب أن يكون عمر الفئران أكبر من 10 أسابيع.استخدم عوامل التخدير المناسبة بالتشاور مع الطاقم البيطري. يتم الحفاظ على درجة حرارة جسم الفئران عند حوالي 36.5 درجة مئوية أثناء الجراحة باستخدام لوحة تدفئة، ثم قم بتجهيز موقع الجراحة، وتطهير الجلد والفراء المحيط، واتركه ليجف. قم بعمل شق في الخط الناصف على طول الرقبة واسحب الأنسجة الرخوة برفق للتفريق بينها.يتم تشريح الشريان السباتي المشترك الأيسر بعناية، وفصله عن الأعصاب المحيطة دون إلحاق الضرر بالعصب المبهم، ثم يتم إجراء ربط باستخدام خيط جراحي مقاس 5.0 إلى 7.0. بعد ذلك، يتم عزل الشريان السباتي الخارجي الأيسر وربط عقدة ثانية. وبعد عزل الشريان السباتي الداخلي الأيسر، يتم ربط عقدة حوله بشكل غير محكم.باستخدام خيط قياس 6.0، سيتم شد العقدة لاحقاً في الإجراء. بعد الحصول على رؤية واضحة للشريان السباتي الداخلي الأيسر والشريان الحنكي الرخوي الأيسر، يتم إغلاق كلا الشريانين باستخدام مشبك EC تحضيراً لإدخال الخيط. يتم عمل ثقب صغير في الشريان السباتي المشترك قبل نقطة تفرعه.يتم بعد ذلك إدخال الخيط أحادي الشعيرة الذي تم تحضيره مسبقاً في الشريان. تُفتح الشرايين المربوطة بينما يتم إدخال الخيط في الشريان السباتي الداخلي. ولإغلاق الشريان المخي المتوسط، يتم ربط العقدة الثالثة على الشريان السباتي الداخلي.لتثبيت الخيط في موضعه، يتم بعد ذلك وضع جل الليدوكائين موضعياً على الجرح لتسكين الألم. أما في العمليات الوهمية، فيتم إدخال الخيط وسحبه على الفور للسماح بإعادة التروية الفورية، ثم يتم إعطاء 0.5 milliliters من المحلول الملحي تحت الجلد لتعويض الحجم. ولدراسة تأثيرات إعادة التروية، يتم فك العقدة الثالثة وإزالة الخيط.فترة زمنية محددة بعد نقص التروية، عادةً بعد 30 إلى 60 دقيقة. في هذا المثال، يُسمح بإعادة التروية بعد 60 دقيقة من إغلاق الوعاء الدموي، مع إعطاء حقنة ثانية من المحلول الملحي لتعويض السوائل. وأخيراً، يتم تقصير الغرز المتبقية وإغلاق الجلد باستخدام خيط جراحي.ضع الحيوانات في قفص مدفأ لمدة ساعتين للتعافي بعد الجراحة، وافحص الحيوانات يومياً للتأكد من عدم وجود علامات عدم ارتياح. قد يحدث فقدان في الوزن بعد الجراحة، لذا يجب توفير طعام مهروس للفئران يوضع في طبق بتري على أرضية القفص لتشجيعها على الأكل.يتم استبدال الطعام يومياً لمدة سبعة أيام. يمكن أن تؤدي مدة تقييد تدفق الدم إلى اختلافات في العجز الحركي والسلوكي. فبعد 30 أو 60 دقيقة من نقص التروية الدماغية، تظهر معظم الحيوانات انخفاضاً في المقاومة.يؤدي الدفع اللاحق والدوران الناتج عن اضطراب في الحركة، بينما تظهر الآفات الأخف وطأة على شكل وضعية ثني في الأطراف الأمامية. ويمكن استخدام هذه العلامات التي يسهل ملاحظتها كدرجة أساسية لتقييم نجاح العملية. كما يمكن تقييم الآفة الناتجة باستخدام إما علم الأنسجة أو التصوير بالرنين المغناطيسي.كما يتضح هنا، فإن سد الشريان الدماغي الأوسط لمدة 60 دقيقة يؤدي إلى نخر نسيجي شامل في منطقة تشمل كلاً من الجسم المخطط و[النص المفقود في المصدر]، بينما يسبب نقص التروية لمدة 30 دقيقة بشكل أساسي موت الخلايا العصبية، المقتصر على الجسم المخطط. يمكن للجراحين المدربين تدريباً جيداً على إجراء MCAO إتقان هذه التقنية في غضون 10 دقائق. وأثناء محاولة تنفيذ هذا الإجراء، من المهم تذكر اتباع إجراءات التشغيل القياسية لضمان نتائج قابلة للتكرار والسيطرة على العوامل المربكة.

modeling-stroke-mice-middle-cerebral-artery-occlusion-with-filament

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

علينا أن نظهر في شريط الفيديو وسيلة لإنتاج وسط انسداد الشريان الدماغي في فئران بالغة باستخدام حيدة داخل اللمعة. علينا أن نبين كيفية تقييم مدى احتشاء الدماغ بواسطة 2،3،5 - triphenyltetrazolium تلطيخ (TTC) كلوريد.

نموذج الفأر من انسداد الشريان الدماغي الأوسط

وسط انسداد الشريان الدماغي داخل اللمعة (MCAO) النموذج هو النموذج الأكثر شيوعا المستخدمة بين النماذج التجريبية السكتة الدماغية. هنا سوف نظهر نموذج كامل بالتفصيل مع دليل flowmetry دوبلر ليزر ، والنتائج ممثلها.

الشريان الدماغي الأوسط انسداد داخل اللمعة (MCAO) النموذجي للاصابة بالسكتة الدماغية مع توجيه الليزر دوبلر Flowmetry في الفئران

يصف هذا الفيديو إجراء تطوير السكتة الدماغية العابرة في نموذج الفئران باستخدام انسداد الشريان الدماغي الأوسط القائم على الخيوط المطلية بالسيليكون ويحاكي النموذج المطور السكتة الدماغية البشرية ، مما يساعد على التحقيق في الاستراتيجيات العلاجية الجديدة لعلاج السكتة الدماغية.

نموذج السكتة الدماغية العابرة القائم على إدخال الفتيرة: إجراء جراحي لإجراء انسداد الشريان الدماغي الأوسط في دماغ الفئران

وتستخدم على نطاق واسع نماذج مختلفة من الفئران وسط انسداد الشريان الدماغي (MCAO) في أبحاث الدماغ التجريبية. هنا، علينا أن نظهر نموذج عبر الجمجمة دائمة القاصي MCAO التي تنتج احتشاء القشرية ثابت من حجم الموافق الضرر الذي تفرضه غالبية السكتات الدماغية الإقفارية الإنسان.

السكتة الدماغية النمذجة في الفئران: التخثر الدائم من الشريان الدماغي الأوسط القاصي

من أجل فهم الفيزيولوجيا المرضية من السكتة الدماغية، فمن المهم استخدام نماذج يمكن الاعتماد عليها. هذه الورقة سوف تصف واحد من النماذج السكتة الدماغية الأكثر استخداما في الفئران، ويطلق عليه نموذج المتوسطة الدماغي انسداد الشريان (MCAo) (كما وصف خيوط داخل اللمعة أو نموذج خياطة) مع ضخه.

نهج الجراحي لانسداد الشريان الدماغي الأوسط وضخه المستحثة السكتة الدماغية في الفئران

السكتة الدماغية هي قضية عالمية مع الحد الأدنى من خيارات العلاج وليس العلاج السريري الحالي لتجديد أنسجة الدماغ المفقودة. هنا نحن وصف طرق لخلق السكتة الدماغية الضوئية دقيقة في القشرة الحركية من القوارض والحقن اللاحقة من المواد الحيوية هيدروجيل لدراسة آثارها على تجديد الأنسجة بعد السكتة الدماغية.

حقن هيدروجيل السقالات المواد الحيوية إلى الدماغ بعد السكتة الدماغية

تستخدم نماذج مختلفة من انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCAo) في أبحاث السكتة الدماغية التجريبية. هنا ، يتم وصف نموذج السكتة الدماغية التجريبية من MCAo عابرة عبر الشريان السباتي الخارجي (ECA) ، والذي يهدف إلى تقليد السكتة الدماغية البشرية ، والتي تتم إزالة خثرة الأوعية الدماغية بسبب تحلل الجلطة العفوية أو العلاج.

النمذجة السكتة الدماغية في الفئران: انسداد الشريان الدماغي الأوسط عابرة عن طريق الشريان السباتي الخارجي

يوضح هذا البروتوكول نموذجا فريدا لضربة الماوس مع احتشاء متوسط الحجم ومعدل بقاء ممتاز. يسمح هذا النموذج لباحثي السكتة الدماغية قبل السريرية بتمديد مدة نقص التروية ، واستخدام الفئران المسنة ، وتقييم النتائج الوظيفية طويلة الأجل.

نموذج معدل لانسداد الشريان الدماغي الأوسط عبر الجمجمة لدراسة نتائج السكتة الدماغية في الفئران المسنة

يصف هذا البروتوكول نموذج نقص التروية الدماغية البؤري العابر في الفئران من خلال انسداد الشريان الدماغي الأوسط داخل اللمعة. بالإضافة إلى ذلك ، يتم عرض أمثلة لتقييم النتائج باستخدام التصوير بالرنين المغناطيسي والاختبارات السلوكية.

نموذج انسداد الشريان الدماغي الأوسط العابر للسكتة الدماغية

يصف هذا البروتوكول عملية التحضير لإعادة تروية انسداد الشريان الدماغي الأوسط عبر الشريان السباتي المشترك.

إعداد نموذج معدل لإعادة تروية انسداد الشريان الدماغي الأوسط

تعلم تقنية انسداد الشريان الدماغي الأوسط بالشعيرة في الفئران لدراسة السكتة الدماغية الإقفارية. تُستخدم هذه الطريقة غير الباضعة لتقييم العجز العصبي والموت الخلوي العصبي.

السكتة الدماغية النمذجة في الفئران -- الشرق انسداد الشريان الدماغي مع نموذج الشعيرة

استكشف المزيد من الفيديوهات