JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدات • 2:34 د • November 28th, 2025
ابدأ بمقاطع أمعاء مصبوغة بالهيماتوكسيلين والإيوسين من فئران متعرضة للإجهاد الحراري، واحدة معالجة مسبقا عن طريق الفم باستخدام العزل كضابط، والأخرى بتعليق Bacillus subtilis .
الإجهاد الحراري يضر بروتينات الوصلات الضيقة في الأمعاء، مما يؤدي إلى تقصير الزغابات وترقق المخاط.
المعالجة المبدئية بالبكتيريا تعزز إطلاق جزيئات الإشارة التي تثبت بروتينات الوصلات الضيقة، مما يحافظ على ارتفاع الزغابات وسماكة المخاط.
راقب المقاطع تحت المجهر الضوئي عالي الدقة لتحديد الفروقات في ارتفاع الزغابة.
بعد ذلك، ضع قطرة من الدم الطازج من كل فأر على شرائح زجاجية وغطها بأغطية الغطاء.
الإجهاد الحراري يزعزع استقرار أغشية كريات الدم الحمراء، مما يطلق الحويصلات الدقيقة في مجرى الدم.
تقلل البكتيريا من الإجهاد التأكسدي الجهازي، وتثبت أغشية كريات الدم الحمراء وتقلل من التصلب.
راقب عينات الدم تحت المجهر الضوئي عالي الدقة لتقييم الفروق في الحويصلات.
يؤكد الحفاظ على ارتفاع الزغابات في المقطع الأمعائي وعدد أقل من الحويصلات الدقيقة في الدم التأثير الوقائي للبكتيريا تحت ضغط الحرارة.
بعد تحضير وتلوين أقسام الأمعاء الدقيقة وفقا لبروتوكول النص، استخدم مجهر عالي الدقة لقياس زغب الأمعاء وسماكة الغشاء المخاطي الكلي. حلل على الأقل أربع عينات من كل فأر وقم بإجراء ما لا يقل عن 20 قياسا في كل عينة.
لإجراء مجهر ضوئي عالي الدقة لعينات الدم، استخدم منصة عزل الاهتزاز كأساس لنظام المجهر مع كاميرا فيديو وكمبيوتر لتسجيل الصور الحية. بعد معايرة صور الاختبار وفقا لبروتوكول النص، ضع سبعة ميكرولترات من الدم المستخرج حديثا من كل فأر على شريحة زجاجية وأضف غطاء تغطي. ثم قم بتصوير وتسجيل عشرة إطارات صور بحجم 72 × 53.3 ميكرومتر مربعة في كل عينة.
وأخيرا، باستخدام برامج توفر صورا بصرية عالية الدقة مباشرة في الوقت الحقيقي، قم بقياس تركيز الحويصلات.