استخراج البكتيريا المقاومة العضلية باستخدام طريقة ضغط تعتمد على الحقنة

خذ نبتة أرابيدوبسيس بأوراق ملقحة مسبقا بالبكتيريا لدراسة تفاعلات النبات مع الميكروبات.

تتكاثر هذه البكتيريا في الفراغ الخلوي بين الخلايا بين خلايا النبات، مكونة مستعمرات دقيقة.

بمجرد استقرار الاستعمار المقاوم، قم باستئصال الأوراق وضعها في حقنة بدون إبر.

أضف ماء مقطر لتغطية الأنسجة.

أدخل المكبس، ثم أمسك الحقنة بشكل مستقيم، واضغط عليها، واضبط المكبس لإطلاق أي هواء محبوس.

أغلق الطرف بطبقة بارا فيلم لتكوين حجرة مغلقة لاستخراج الأبوبلاست.

اضغط الضغط الإيجابي بدفع المكبس حتى يصبح النسيج مظلما، مما يشير إلى الضغط ودخول الماء إلى الفراغات بين الخلايا لإزاحة البكتيريا.

بعد ذلك، طبق ضغطا سلبيا بسحب المكبس لتوسيع مصفوفة الأنسجة وسحب السوائل والبكتيريا.

كرر دورات الضغط لتوليد قوى قص تعطل المستعمرات الدقيقة، مما يطلق البكتيريا دون إتلاف نسيج النبات.

افتح الحقنة واجمع السائل المقاوم الذي يحتوي على البكتيريا المتناثرة لمزيد من التحليل.

بعد أربعة أيام من التطعيم، اقطع إما الجزء الجوي من نبات الأرابيدوبسيس أو الورقة الملقحة من نبات الفاصوليا وضعها في حقنة بسعة 20 ملليلتر بدون إبرة.

بالنسبة لأوراق الفاصوليا، لف الورقة على نفسها، تاركا الوجه السفلي للخارج. أضف كمية كافية من الماء المقطر لتغطية الأنسجة. بعد ذلك، أدخل المكبس الذي يثبت الحقنة في وضع مستقيم وأزل الهواء الزائد وفقاعات الهواء داخل الحقنة عن طريق النقر بلطف على البرميل حتى يصبح كل الهواء قريبا من الطرف، وبعد إزالة الهواء، غط طرف فوهة الحقنة بطبقة البارافين.

الآن اضغط بحذر على المكبس لتوليد ضغط إيجابي حتى يتحول النسيج إلى لون داكن. ثم اسحب المكبس لتوليد ضغط سلبي. قم بإزالة طبقة البارافين والمكبس واجمع السائل الذي يحتوي على البكتيريا المستخرجة من الأبوبلاست.