توصيل الجزيئات الحيوية الفلورية المعتمدة على الحفر الكهربائي إلى الخلايا البكتيرية

ابدأ بكوفيت مبرد يحتوي على تعليق من خلايا بكتيرية كهروفاء، والتي تزيد من قابليتها لنفاذية الغشاء.

يحتوي التعليق أيضا على جزيئات حيوية موسومة بفلوروفورات عضوية.

تطبيق نبضة كهربائية عالية الجهد لإنشاء مسام غشائية مؤقتة، مما يمكن دخول الجزيئات الحيوية إلى السيتوبلازم.

أضف وسطا غنيا بالمغذيات وانقل الخلايا إلى أنبوب. حضن الأغشية لتعزيز إصلاح الغشاء.

تقوم بطرد المركز، ثم تتخلص من المادة الفائقة التي تحتوي على جزيئات حيوية غير داخلية.

أعد تعليق الخلايا في محلول عالي الملح يحتوي على منظف لفصل الجزيئات الحيوية الملتصقة بالسطح.

قم بجهاز الطرد المركزي مرة أخرى، وتخلص من السوبرناتانت، وأعد تعليق الخلايا في المخزن المؤقت.

نقل التعليق إلى فلتر وجهاز طرد مركزي للتخلص من التدفق الذي يحتوي على أي جزيئات حيوية غير داخلية. ثم اشطف الخلايا بمحلول جديد وأعد تعليقها.

قم بتركيب الخلايا على وسادة أجاروز وضع غطاء منزلي. البكتيريا الموسومة بالفلورية جاهزة للعرض.

بدءا من مخزون من الجزيئات الحيوية الفلورية المحضرة في مخزن أيوني منخفض القوة، انقل ما يصل إلى خمسة ميكرولتر من الجزيئات الحيوية إلى 20 ميكرولتر من البكتيريا المؤهلة أو 50 ميكرولتر من خلايا الخميرة الفعالة. كمية الجزيئات الحيوية الفلورية التي تحضن مع الخلايا ترتبط مباشرة بكمية الجزيئات الحيوية التي تم استيعابها لكل خلية بعد التسامح الكهربائي.

حضن الخليط على ا