موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 2:10 دقيقة • November 28th, 2025
قم بتطعيم ثقافة تحتوي على أنواع السالمونيلا وغير السالمونيلا في وسط سيستين السيلينيت، وحضن.
يثبط السيلينيت نمو البكتيريا الحساسة للسيلينيوم عن طريق تعطيل عمليات الأيض لديها.
ومع ذلك، يمكن للبكتيريا المقاومة للسيلينيوم، بما في ذلك السالمونيلا، أن تستقلب السيلينيت وتنمو.
انشر الزراعة على زيلوز ليسين ديوكسولات أو أجار XLD، واحتضن.
تقلل السالمونيلا ثيوسلفات الصوديوم في أجار XLD إلى كبريتيد الهيدروجين، الذي يتفاعل مع أيونات الحديدية في الوسط لتكوين كبريتيد الحديد الأسود، مما ينتج مستعمرات ذات مراكز سوداء.
على النقيض من ذلك، فإن الأنواع غير السالمونيلا التي لا تنتج كبريتيد الهيدروجين تشكل مستعمرات بدون مراكز سوداء، مما يسمح بالتمييز البصري عن السالمونيلا.
اختر مستعمرة ذات مركز أسود ووضعها على أجار السالمونيلا الكروموجيني لتحسين الخصوصية.
يحتوي الأجار الكروموجيني على ركائز إنزيمية خاصة بالسالمونيلا مرتبطة بالكروموفورات.
تقوم إنزيمات السالمونيلا بقطع هذه الركائز، مما يطلق الكروموفورات ويكون مستعمرات مصبوغة.
اختر هذه المستعمرات لمزيد من التحليل.
أضف 100 ميكرولتر من الثقافة المسبق إلى خمسة ملليتر من وسط بلورة السيلينيت. ثم حضن الثقافة على درجة حرارة 36 درجة مئوية لمدة 18 إلى 24 ساعة. بعد ذلك، اجمع حلقة واحدة من الزراعة ووزعها على طبق.
ثم حضن الطبق على درجة حرارة 36 درجة مئوية لمدة 18 إلى 24 ساعة. بعد الحضانة، اختر مستعمرات مشبوهة وانقلها إلى صفيحة. حضن الطبق عند 36 درجة مئوية لمدة 18 إلى 24 ساعة.