موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 5:43 دقيقة • November 28th, 2025
خذ ورقة مصابة ببكتيريا كانديداتوس ليبريباكتر، وهي بكتيريا ممرضة.
قم بتقطيعه إلى قطع، وتجميده بسرعة في النيتروجين السائل، وطحن الخلايا النباتية وإطلاق محتوياتها، بما في ذلك البكتيريا.
أضف محلول تحلل النوى وامزج جيدا.
حضن على درجة حرارة عالية لتحلل الأغشية، مما يطلق الحمض النووي الجيني من نوى النباتات والخلايا البكتيرية.
أضف إنزيم RNase، ثم قلب الأنبوب ليخلط، ثم حضن لتحليل الحمض النووي الريبي.
أضف محلول ترسيبي للبروتين وامزجه لتعزيز تجمع البروتين. الطرد المركزي إلى بروتين الحبيبات والحطام الخلوي.
انقل المادة الفائقة إلى أنبوب يحتوي على الأيزوبروبانول وامزج الحمض النووي لترسيب الحمض النووي إلى خيوط مرئية. جهاز طرد مركزي لاستبعاد الحمض النووي.
اغسل الحبيبة بالإيثانول لإزالة الشوائب، وجففها في الهواء، وترطيب الحمض النووي.
حضن العينة عند درجة حرارة عالية لإذابة الحمض النووي، ثم تحميل عينة في ميكروكوفيت.
باستخدام مقياس الطيف الضوئي، قس تركيز الحمض النووي المعزول.
أولا، استخدم مقصا نظيفا لقطع ورقة طازجة كاملة من شجرة حمضيات، وضعه في كيس ساندويتش بلاستيكي نظيف. ثم قم بتبريد الهاون والمدقة بإضافة كمية صغيرة من النيتروجين السائل. بعد ذلك، استخدم المقص لقطع قطع صغيرة من نسيج الورقة، بحجم يقارب بوصة مربعة واحدة.
ضع قطع الأوراق في الهاون لتجميدها فورا. ابدأ بسرعة في طحن نسيج الورقة بالهاون حتى يتبخر النيتر
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية