فحص البكتيريا البحرية لعزل السلالات المسببة للتلوث

خذ عينة من مياه البحر تحتوي على ميكروبات متنوعة، بما في ذلك البكتيريا التي تدمر ملوثات البيئة.

قم بتخفيف العينة بشكل تسلسلي لتقليل كثافة الميكروبات ووضعها على وسط مغذي.

بعد الحضانة، اختر مستعمرات مميزة شكليا، قد تحتفظ بأنواع بكتيرية متنوعة جينيا وأيضيا.

قم بتقسيم كل مستعمرة مختارة لتشتيت الخلايا الفردية والاحتضان.

تشكل كل خلية مستعمرة تمثل عزلة بكتيرية نقية وراثيا ذات ملف أيضي مميز.

قم بتطعيم كل عزل في وسط نمو وحضنه لزيادة الكتلة الحيوية.

قم بالطرد المركزي في الثقافة، وتخلص من السوبرناتان، واغسله باستخدام محلول مؤقت لإزالة الوسط المتبقي.

أعد تعليق الخلايا في المخزن المؤقت وتلقيحها في وسط انتقائي يحتوي على EE2، وهو ملوث بيئي.

باعتباره المصدر الوحيد للكربون في الوسط، يختار EE2 البكتيريا التي يمكنها استقلابه للطاقة والنمو.

تشير العكارة في الوسط إلى نمو البكتيريا، مما يؤكد عزل العزل البكتيري المسبب للملوثات.

لاختيار البكتيريا، يجب أولا إجراء تخفيفات تسلسلية تصل إلى 10 إلى سالب 9 في محلول ملحي معقم لعينات المرجان، وحتى 10 إلى سالب ستة لعينات المياه. تخفف البيبيت لأعلى ولأسفل خمس مرات قبل أن تتخلص من الطرف.

ثم، اجعل كل واحدة منها دوامة. قم بتدوير العينات لمدة خمس ثوان في كل مرة قبل تنفيذ التخفيف التسلسلي التالي. بيبيت 100 ميكرولتر من كل تخفيف على أطباق بتيري تحتوي على 3٪ كلوريد الصوديوم ليسوجيني مر