الإثراء الانتقائي والعزل للبكتيريا البحرية المتحللة للنفط من عينات مياه البحر

ابدأ بعينة من مياه البحر تحتوي على مجتمعات ميكروبية متنوعة، بما في ذلك بكتيريا قادرة على تحلل الهيدروكربونات.

قم بتخفيفات تسلسلية للعينة في محلول ملحي لتقليل كثافة الميكروبات.

أضف النفط الخام إلى الماء المقطر المعقم وحرك الخليط لإذابة جزئيا مكونات الهيدروكربونات في الزيت.

اترك الخليط يستقر، مفصولا إلى أجزاء زيتية قابلة للذوبان في الماء وغير قابلة للذوبان في الماء.

جهز ألواح أجار انتقائية باستخدام كل جزء من الزيت كمصدر كربون وحيد لإثراء البكتيريا التي تحلل الهيدروكربونات القابلة للذوبان أو الكارهة للماء.

ضع عينات مياه البحر المخففة على وسط انتقائي وحضنتها عند درجة الحرارة المحيطة.

تعتمد المستعمرات التي تظهر على إنزيمات مثل الهيدروكسيلاز والديوكسينازات لأقلاب الهيدروكربونات.

اختر مستعمرات مميزة شكليا وضعها على وسط جديد يحتوي على نفس نسبة الزيت للحصول على مزارع نقية من البكتيريا المتحللة للهيدروكربونات.

تمكن هذه الطريقة من العزل الانتقائي للبكتيريا البحرية المتحللة للزيت.

لتحضير وسط بسيط يحتوي على جزء قابل للذوبان من الزيت والماء وجزء غير قابل للذوبان من الزيت والماء كمصدر كربون وحيد، أضف 1-2٪ من النفط الخام إلى 500 ملليلتر من الماء المقطر المعقم في قارورة فلتر تحتوي على صمام في الأسفل. حافظ على القارورة تحت تحريك مستمر عند 24 إلى 28 درجة مئوية عند 150 ضعف الغرام لمدة 48 ساعة. بعد ذلك، ضع القا