في المختبر نموذج الزراعة الدفعية لمحاكاة تخمير القولون بواسطة ميكروبيوتا الأمعاء البشرية

ابدأ بأنبوب موضوع داخل غرفة لا هوائية تحتوي على وسط غني بالعناصر الغذائية وألياف قابلة للتخمير مسبقا.

الظروف التي تعاني من نقص الأكسجين داخل الأنبوب تحاكي البيئة اللاهوائية للقولون البشري.

بعد ذلك، أضف عينة براز مخففة وموحدة تحتوي على ميكروبات معوية إلى الأنبوب وحضنتها.

قم بقلب الأنبوب بانتظام لخلط الميكروبات مع الألياف.

خلال الحضانة، تقوم الميكروبات باستقلاب وتخمير الألياف بشكل لاهوائي، مما ينتج أحماض دهنية قصيرة السلسلة ومستقلبات أخرى، مما يخفض درجة الحموضة في الوسط.

اجمع الأليكوات من خليط التخمير على فترات منتظمة لمراقبة إنتاج المستقلبات وفحص درجة حموضةها.

قم بعمل الطرد المركزي على العليكوات عند درجات حرارة منخفضة لفصل الكتلة الحيوية الميكروبية إلى حبيبة.

انقل المادة الفائقة التي تحتوي على المستقلبات والأحماض الدهنية قصيرة السلسلة إلى أنبوب جديد.

تجميد كل من الكتلة الحيوية الميكروبية والفائق في النيتروجين السائل.

وأخيرا، تخزين العينات على درجة حرارة منخفضة لمزيد من التحليل.

حافظ على الأنابيب الملقحة عند 37 درجة مئوية داخل الحجرة اللاهوائية، وقلب الأنابيب بلطف مرة كل ساعة لإعادة تعليق الألياف واللقاح. بعد 3 أو 6 أو 9 أو 24 ساعة، أخرج الكمية المناسبة من الوسائط المخمرة، وقم بطرد مركزي بالعينات بحرارة 14,000 مرة في الغرام لمدة 10 دقائق عند أربع درجات مئوية.

جمد الفائق العطر والحبيبات فورا في النيتروجين السائل، ثم بعد التجميد المفاجئ، أخزن المادة الفائقة لتحليل الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة، والحبيبات لتحليل الميكروبيوم عند ناقص 80 درجة مئوية.