موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 3:42 دقيقة • January 30th, 2026
ابدأ بإضافة محلول يحتوي على مجسات التهجين الفلوري في الموقع (FISH) الخاصة ببكتيريا 16S rRNA إلى شريحة تحتوي على مقاطع أمعاء الفأر التي استعمرتها البكتيريا.
ضع غطاء لنشر المجسات السائلة ومنع التبخر.
حضن السلايد في غرفة رطبة عند درجة حرارة مرتفعة.
هذا يفتح البنية الثانوية للحمض النووي الريبي، مما يسهل تهجين المسبار مع التسلسلات التكميلية في الحمض النووي البكتيري 16S rRNA.
أزل الغطاء واحتضن الشريحة في مخزن غسيل مسخن مسبقا لإزالة المجسات غير المربوطة.
اشطف بمحلول فوسفات للحفاظ على الرقم الهيدروجيني الفسيولوجي.
ضع صبغة مضادة تحتوي على صبغة خاصة بالمخاط وصبغة نووية، ثم حضنها.
ترتبط هذه الأصباغ بشكل انتقائي بالمخاط المعوي وبحمض نووي لخلايا البكتيريا والمضيف. اغسل السلايد باستخدام مخزن مؤقت وثبت أغطية الغطاء على الشريحة باستخدام وسائط التثبيت.
تحت المجهر الكونفوكلي، راقب البكتيريا الموسومة ب FISH، وخلايا الأمعاء، وطبقة المخاط داخل المقاطع.
أنشئ دوائر متقاربة جدا حول كل قسم من الأنسجة باستخدام حاجب سائل أو قلم PAP للحد من مساحة التمدد التي يجب تغطيتها بمحلول التهجين، وتجنب ملامسة الحبر للقسم.
جهز محلول التهجين وأضف 0.5 ميكروغرام من المجس لكل 50 ميكرولتر من المحلول المستخدم. قم بطباعة المحلول على الأقسام الموجودة في الشريحة. غطى القسم بأغطية بلاستيكية مرنة، لضمان أن حجم السائل المستخدم يغطي القسم بأكم
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية