JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدات • 2:55 د • February 2nd, 2026
ابدأ بمخزون مجمد من البكتيريا الفطرية السلية، وهي بكتيريا ممرضة تسبب السل الرئوي.
قم بإذابة القارورة وامزج التعليق بلطف لتفريق الكتل البكتيرية وضمان تركيز متساو.
تخفيف الحجم المطلوب في المخزن المعقم لتحضير لقاح هواء موحد للرذاذ.
قيد الفأر في حامل شبكة للحد من الحركة، وضعه داخل غرفة التعرض المغلقة للرذاذ.
تحميل اللقاح المحضر في حقنة وحقنها في وحدة النيبوليزر المتصلة بالحجرة.
فعل نظام الاستنشاق، الذي يستخدم الهواء المضغوط لتحويل التعليق إلى قطرات دقيقة قابلة للتنفس.
تنتشر هذه القطرات، التي تحتوي على M. tuberculosis القابل للحياة، في هواء الحجرة.
يستنشق الفأر الواعي الهباء الجوي، مما يسمح للبكتيريا الحية بالتوغل عميقا في الرئتين وبدء العدوى.
نموذج الفأر للسل الرئوي جاهز الآن لمزيد من الدراسات.
ابدأ بتسخين مخزونات متفطرة السل من عيار CFU معروف. عندما تذوب الخلايا، استخدم حقنة بسعة 1 ملليلتر مزودة بإبرة عيار 27 لخلط التعليق بعناية خمس مرات لتشتيت الكتل البكتيرية، وتجنب إنتاج الهباء الجوي. اعتمادا على الجرعة المطلوبة من العدوى، انقل الحجم المطلوب من مخزون الفطر الفطري إلى أنبوب بسعة 50 ملليلتر يحتوي على PBS معقم إلى حجم نهائي يبلغ 6 ملليتر. بعد ذلك، ضع التجريبية بشكل فردي في سلال شبكية مقسمة. ضع السلال في غرفة الهباء الجوي الدائري وأغلق غطاء الحجرة.
قم بتثبيت وحدة فينتوري-نيبولايزر على وصلات الثلاثة من الفولاذ المقاوم للصدأ. استنشاق التعليق البكتيري الفطري إلى حقنة بسعة 10 ملليلتر، مزودة بإبرة غير حادة عيار 18، وحمل الحقنة إلى غرفة الهباء الجوي في صندوق نقل مغلق. الآن أزل غطاء برغي جهاز التنشيح وحقن تعليق البكتيريا الفطرية بحذر في الوحدة، مع الحرص على تجنب تكوين الهباء الجوي.
تخلص من الحقنة في حاوية حادة تحتوي على 2٪ بوراتون، ثم أغلق جهاز البخاخ.
شغل جهاز الاستنشاق.
عند اكتمال الدورة، تأكد من أن تعليق البكتيريا الفطرية قد تم تثبيته بالكامل.