موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 2:24 دقيقة • February 2nd, 2026
ابدأ بفأر مخدر يعاني من جرحين جلديين استئصاليين كامل السماكة على الظهر، مع إزالة كل من الطبقتين البشرية والجلدية جراحيا.
يغطي الجروح ضمادة شفافة بطبقة من الفيلم لعزل الموقع ومنع التلوث الخارجي.
اسمح للفأرة بالتعافي لفترة محددة.
خلال هذا الوقت، يدخل الدم الذي يحتوي على مكونات مختلفة إلى الجرح. هذا ينشط الصفائح الدموية، مما يحفز تجميع مصفوفة مؤقتة مكونة من الفيبرين والفيبرونكتين والبروتيوجليكانات، ويبدأ تكوين جلطات الدم.
أعد تخدير الفأر وحقن محلول ملحي في كل جانب للحفاظ على الترطيب.
بعد ذلك، حقن جرعة محددة من سلالة مضيئة من Pseudomonas aeruginosa عبر الغلاف في كل جرح.
تستقر البكتيريا داخل المصفوفة المؤقتة، التي تدعم التصاقها ونموها.
معا، يوفر المصفوفة وطبقة الغلاف بيئة ملائمة لتكون الأغشية الحيوية، مما يؤدي إلى عدوى مزمنة موضعية.
سجل التوهج لمراقبة العدوى البكتيرية.
بعد 24 ساعة من الجراحة، قم بوزن الفأر المعاد تخديره مرة أخرى وحقن تحت الجلد ب 250 ميكرولتر من كلوريد الصوديوم المعقم 0.9٪ المسخن مسبقا في كلا الجانبين.
بعد ذلك، تحميل 100 ميكرولتر من نظام تعليق التنصاف المتوهج P. aeruginosa في حقنة أمان بسعة 500 ميكرولتر مزود بإبرة قياس 27 وحقن 40 ميكرولتر من تعليق البكتيريا عبر ضمادة الفيلم الشفاف في كل جرح.
تأكد من خلط التعليق البكتيري جيدا وأن الضمادة الشفافة سليمة. تأكد من ثقب الضمادة الشفافة مرة واحدة فقط باستخدام الإبرة ذات الجانب المائل للأعلى.
ثم أعد الفأر إلى قفصه على وسادة تسخين مع مراقبة وقدم معجون مكملات غذائية عالي السعرات بين حبيبات الطعام على أرضية القفص.