موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 2:02 دقيقة • February 2nd, 2026
خذ فأر مخدر به شقوق جلدية مصابة ببكتيريا ممرضة.
تم تعديل البكتيريا وراثيا لحمل بلازميد يحتوي على نظام الإبلاغ luxABCDE ، الذي يتيح التلألؤ البيولوجي الذاتي.
ضع الفأر في وضعية الاستلقاء على منصة التصوير الحيوي.
في موقع العدوى، ترمز جينات luxA وluxB للبكتيريا إنزيم اللوسيفيراز، بينما ترمز جينات luxCDE إنزيمات تصنع الألدهيدات الدهنية طويلة السلسلة، والتي تعمل كركيزة للوسيفيراز.
في وجود الأكسجين، يحفز لوسيفيراز أكسدة العامل المساعد الخاص به، وهو الفلوفين مونوكليوتيد المختزل، الذي يتفاعل بعد ذلك مع الألدهيد الدهني طويل السلسلة، منتجا ضوءا أزرق أخضر.
يشير هذا التوهج الحيوي إلى وجود بكتيريا نشطة أيضيا في موقع العدوى.
باستخدام نظام التصوير، قم بتصوير موقع العدوى وقياس شدة إشارة التلألؤ الحيوي.
للتصوير الحية للجروح المصابة، اتبع بروتوكولات احتواء المستوى الثاني من السلامة البيولوجية لنقل الفئران إلى وإلى جهاز التصوير ووضع الفأر المخدر في وضعية الاستلقاء داخل غرفة التصوير.
في برنامج التصوير، اضبط وقت التعريض، والتقطيع، وتوقف التردد، ومجال الرؤية حسب المناسبين للتجربة.
بعد ذلك، أنشئ منطقة اهتمام في موقع الجرح وقس متوسط التدفق المكتشف بالفوتونات في الثانية.
لقياس الخلفية، أنشئ منطقة اهتمام على منطقة عشوائية على منصة التصوير وطرح عدد الفوتونات في الخلفية في الثانية.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية