التصوير اللحظي للعدوى البكتيرية في نموذج الفأر باستخدام التلألؤ الحيوي

خذ فأر مخدر مصاب مسبقا بسلالة بكتيرية ممرضة تم تعديلها للتعبير عن أوبرون تلألؤ حيوي متكامل وراثيا.

يشفر الأوبرون لوسيفيراز ومجمع متعدد الإنزيمات يصنع ركيزته.

يحفز إنزيم اللوسيفيراز تفاعلا مع هذه الركائز، مما ينتج تلألؤا مرئيا.

ضع الفأر في وضع الاستلقاء على الظهر على منصة غرفة التصوير المثبتة بدرجة الحرارة وحافظ على التخدير أثناء التصوير.

استخدم نظام التصوير لالتقاط صور الأشعة السينية المضيئة الحيوية والصور المقابلة للفأرة.

تكشف الصورة المتوهجة الحيوية عن مدى العدوى البكتيرية، بينما توفر صورة الأشعة السينية مرجعا تشريحيا لتحديد موقع العدوى.

بعد التصوير، أعد الفأر إلى قفصه واترك التعافي.

التقط صور التوهج الحيوي على فترات منتظمة لمراقبة تقدم العدوى البكتيرية في الوقت الحقيقي.

مع مرور الوقت، يؤكد وجود إشارات مضيئة حيوية في مواقع مختلفة انتشار العدوى في جميع أنحاء المضيف.

لتصوير، جهز نظام التصوير عن طريق ضبط معلمات الكاميرا وتسخين المسرح. اضبط تدفق الأكسجين إلى 1.5 لتر في الدقيقة والإيزوفلوران إلى 3.5٪ وانقل الفأر إلى غرفة التخدير، ثم إلى مرحلة تثبيت درجة الحرارة بعد التخدير. ضع الفأر على ظهره مع مد الذراعين وركب مخروط أنف لإعطاء 2.5٪ من الإيزوفلوران أثناء التصوير.

أغلق الباب والتقط صورا مضيئة حيويا وأشعة سينية للفأرة. عند الانتهاء من التصوير، أعد الفأرة إلى قفصها وراقبها. يجب أن يستعيد وعيه خلال 3 إلى 5 دقائق.