موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 2:34 دقيقة • January 30th, 2026
ابدأ بفأر مستيقظ، مقيد لتقليل حركته.
اميل الرأس للأسفل لكشف الجزء السفلي من البطن.
حدد موقع منتصف البطن وحدد موقع الحقن خارج المركز قليلا لتجنب الأعضاء الداخلية.
بعد ذلك، خذ حقنة تحتوي على محلول من عدادات السكريات الدهنية، وهو مكون من غلاف الخلايا البكتيرية سالبة الجرام.
أدخل الإبرة في الموقع للوصول إلى التجويف الصفاقي، ثم حقن المحلول.
بمجرد الحقن، يدخل LPS الدورة الدموية الجهازية ويحفز استجابة مناعية.
في مجرى الدم، يرتبط LPS ببروتين رابط LPS، الذي ينقله إلى CD14، وهو بروتين غشائي على الخلايا المناعية.
يوصل CD14 LPS إلى MD-2، وهو بروتين جليكوبروتين يرتبط بمستقبل شبيه ب Toll-4 (TLR4)، مما يمكن من تثبيط TLR4.
يستعين TLR4 المدمج بروتينات متكيفية تنشط مسارات الإشارات اللاحقة، مما يحفز تعبير السيتوكينات الالتهابية والالتهاب الجهازي.
هذا يجسد نقل الميكروبات وتنشيط المناعة الجهازية في الأمعاء وأعضاء أخرى ناتجة عن المنتجات البكتيرية.
تعامل مع الفأر بلطف ولكن بحزم، وقيد بيد واحدة. تأكد من أن الفأر ممسك بإحكام ويمكنه التنفس بشكل طبيعي.
ارفع أنف الفأر قليلا نحو الأرض لكشف البطن للحقن. حدد خط منتصف البطن وحقن حجم LPS المطلوب في الجانب السفلي الأيسر أو الأيمن.
من المهم جدا التأكد من دخول الإبرة إلى تجويف الصفاق لتجنب الحقن الخاطئ.
يجب ألا تغوص الإبرة عميقا جدا في تجويف الصفاق لتجنب إصابة الأعضاء الداخلية.
أعد برفق إلى قفص المنزل.
راقب الفئران لمعرفة حدوث وشدة السموم الداخلية في الدم عند الحقن وكل ساعتين بعد ذلك لمدة 8 ساعات. سجل الملاحظات في ورقة النتائج المرفقة.