تصوير حي لتفاعلات المضيف مع الممرض في أجنة سمك الزرد المصابة بخراج الفطرطرية

ابدأ بأجنة سمك الزرد المخدر الشفاف والمعدل وراثيا التي تعبر عن بلاعم موسومة فلورية.

يتم حقن الأجنة مسبقا في عضلة الذيل باستخدام إجهاد خشن يحمل علامة فلورية على شكل خراج الفطريات لتحفيز عدوى موضعية.

غياب الجليكوبتيدوليبيدات السطحية في هذه البكتيريا يعزز تجمعها.

ثبت الأجنة في أجاروز منخفض نقطة الانصهار ووجهها لكشف موقع العدوى.

بمجرد أن يتصلب الأغاروز، أضف ماء السمك الذي يحتوي على مادة مخدرة للحفاظ على التخدير ومنع الجفاف.

راقب العدوى في الوقت الحقيقي عبر المجهر الفلوري.

بعد العدوى، تهاجر البلعم الداخلية نحو الخلايا الفردية للبكتيريا والبلعمية.

ومع ذلك، تشكل بعض البكتيريا حبالا—تجمعات خارجية ممدودة تتكاثر وتنتشر وتقاوم البلعمة، مما يسبب موت خلايا المضيف وتسلل المناعة.

رغم ذلك، تفشل الخلايا المناعية في القضاء على الحبال البحرية، مما يسمح للبكتيريا وخلايا المضيف الميتة بالتراكم وتكوين خراج.

هذا يكشف عن الحبال كمفتاح M. استراتيجية التهرب المناعي من الخراج .

للتصوير الحي لعدوى العقدة المتعددة ، قم بتركيب أجنة مخدرة ترايسين في أغاروز منخفض نقطة الانصهار بنسبة 1٪ في طبق بترى بقاع زجاجي مقاس 35 ملم لاستخدام مجهر مقلوب أو شريحة تجويف واحدة للمجهر الكونفوكالي العمودي. وجه الجنين إلى الموضع المطلوب وغط الأغاروز المتصلب بماء السمك الذي يحتوي على الترايكين. وأخيرا، استخدم مجهر فلوري بهدف 10X أو مجهر كونفوك