موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 2:19 دقيقة • February 2nd, 2026
ابدأ بزراعة سلالة أيرموناس ، وهي ممرض بكتيريا، تنمو في وسط غني بالمغذيات.
قس الكثافة البصرية للزراعة وضبط تركيز البكتيريا لضمان حمل عدوى ثابت.
قم بتغليف الزراعة على وسط نمو الديدان الخيطية أو أجار NGM وحضن لتشكيل طبقة بكتيرية متجانسة.
تحضير يرقات C. elegans المتزامنة تطوريا - وهي دودة خيطية بكتيرية محفوظة على وسط مخصب.
انقل اليرقات إلى الطبقة البكتيرية وحضن اليرقات للسماح بابتلاع أيروموناس عن طريق الفم وتمكين استعمار الأمعاء.
داخل المضيف، تتكاثر البكتيريا وتطلق سموما خلايا تضر بخلايا الظهارة في الأمعاء، مما يؤدي إلى الوفاة.
انقل الديدان الخيطية الناجية إلى صفائح بكتيرية طازجة وعد عدد الديدان الحية والميتة وغير المستجيبة يوميا حتى تموت آخر دودة.
وأخيرا، قم بإنشاء منحنى بقاء لتقييم قدرة المضيف على البقاء مع مرور الوقت.
أولا، اختر مستعمرة واحدة لكل من سلالات أيروموناس الأربع وزرعها وفقا لبروتوكول النص. ثم قس امتصاص المرقالبكتيري بمقدار OD 600 وضبطه حتى يصبح الامتصاص مساويا ل2.0.
بعد ذلك ضع 30 ميكرولتر من مرق البكتيريا من كل سلالة في أطباق NGM.
اختر وينقل ديدان L4 المعدة مسبقا بشكل عشوائي إلى ألواح NGM مع سلالات Aeromonas. ثم حضانة الألواح عند 20 درجة مئوية حتى يكتمل الاختبار.
كل يوم انقل جميع الديدان الحية إلى صفيحة NGM جديدة تحتوي على بكتيريا. عد أعداد ديدان الحي والميت وديدان الاستشعار كل يوم حتى تموت آخر دودة.