JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدات • 1:28 د • January 30th, 2026
ابدأ بعينة ماء ملوثة من المحتمل أن تحتوي على القولون البرازي، بما في ذلك الإشريكية القولونية.
إجراء تخفيف تسلسلي في الماء المقطر لتقليل العكارة والحمل الميكروبي.
اخلط العينة المخففة المطلوبة مع وسط المغذيات وحملها في شريحة ميكروفلويدية.
استخدم ترشيح الفراغ لالتقاط البكتيريا على غشاء داخل قناة السربنتين للشريحة.
أضف وسط مغذي إلى الحجرة العلوية وحضن البكتيريا لتعزيز تعافي البكتيريا.
استبدال الوسط بمحلول من فاجات خاصة بالإشريكية القولونية التي تحمل جين اللوسيفيراز.
حضن للسماح بعدوى العشائم، حيث يتكرر حمض الفاج النووي ويحلل حمض المضيف النووي ويشكل عاثيات جديدة مع إنتاج لوسيفيراز. ثم تتحلل الخلايا المصابة لتفرز اللوسيفيراز.
تطبيق ترشيح الفراغ لنقل اللوسيفيراز إلى غشاء التقاط.
أضف ركيزة تتفاعل مع لوسيفيراز لتوليد إشارة مضيئة.
باستخدام أنبوب مضاعف ضوئي، قس التلميع، الذي يتناسب مع عدد خلايا الإشريكية القولونية الحية في عينة الماء.