موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 2:05 دقيقة • February 26th, 2026
خذ صفيحة متعددة الآبار تحتوي على معلقات لبكتيريا غير ممرضة، تعمل كضابط، وسلالات مختلفة من البكتيريا الممرضة لتقييم ضراوتها النسبية.
تعلق البكتيريا في وسط محدود بالعناصر الغذائية لمنع النمو الزائد ولمحاكاة بيئة مناسبة للعدوى.
أضف ديدان C. elegans من المرحلة L4 إلى كل بئر وحضن الصفيحة تحت تحريك مستمر لتعزيز الاتصال بين البكتيريا والديدان.
تتغذى الديدان على البكتيريا، التي تدخل أمعاؤها وتستعمرها.
تطلق البكتيريا الممرضة سموما تضر بأنسجة الأمعاء، مما يؤدي إلى سمية جهازية وموت الديدان في النهاية.
بعد الحضانة، عد الديدان الحية في كل بئر وأنشئ رسما بيانيا لتقييم معدلات بقائها.
تعكس الفروقات في معدلات بقاء الديدان الضراوة النسبية لكل سلالة بكتيرية.
بعد زراعة سلالات أيروموناس وقياس امتصاصها كما هو موضح سابقا، قم بطرد مركزي المرق البكتيري عند 3,500 جرام لمدة 15 دقيقة. عدل المرق البكتيري باستخدام S Medium وأضف 195 ميكرولتر من المرق البكتيري في الوسط S إلى ثمانية آبار من طبق يحتوي على 96 بئر. اغسل الديدان عن لوحة ENGM باستخدام M9 متوسط. ثم قم بضبط تركيز محلول الديدان إلى خمسة ديدان لكل ميكرولتر.
أضف 5 ميكرولتر من محلول الدودة إلى كل بئر من آبار صفيحة 96 بئرا. حضن الطبق على هزاز، وعد عدد الديدان الحية عند 24 و48 و72 ساعة.