موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 2:30 دقيقة • February 26th, 2026
ضع سمك الزرد البالغ في مياه عدوى معقمة وأضف سلالة Vibrio cholerae الممرضة بالكثافة المطلوبة.
غط الكأس بغطاء مثقب لمنع السمكة من القفز والاحتضانة.
تبتلع أسماك الزرد البكتيريا التي تصل إلى الأمعاء، وتدفع عبر طبقة المخاط باستخدام سوطها، وتلتصق بالظهارة.
تستعمر الظهارة وتفرز سموما تعطل سلامة الأمعاء، مما يؤدي إلى تسرب الأيونات والسوائل والبروتينات.
كما أن هذه السموم تحفز إفراز مخاط الظهارة، مما يعزز الاستمرارية البكتيرية.
تراكم السوائل والمخاط ومحتويات الأمعاء يؤدي إلى إسهال مائي، يمكن اكتشافه بزيادة عكارة الماء.
بعد الحضانة، اجمع الأسماك وتخلص من الماء الملوث في مطهر.
انقل الأسماك إلى ماء معقم لإزالة البكتيريا السطحية.
اجمع الأسماك وانقلها مرة أخرى إلى مياه معقمة لمزيد من التحليل.
بعد تحضير مزارع V.cholerae ، قم بتلقيح سمك الزرد بالغمر. أولا، ضع أربع أو خمس أسماك زرد في كأس بسعة 400 ملليلتر يحتوي على 200 ملليلتر من ماء العدوى المعقم. ثم أضف 1 ملليلتر من زراعة V. cholerae للحصول على تركيز العدوى المطلوب.
ثم غط الكأس بغطاء مثقب. بعد تجهيز جميع الكؤوس، انقلها إلى حاضنة زجاجية أمامية مضبوطة على 28 درجة مئوية. للتعرض العابر، بعد حوالي ست ساعات، صب ماء الكأس عبر شبكة صيد لجمع الأسماك. يجب التخلص من الماء المصاب في مادة المبيض لقتل البكتيريا.
ثم ضع السمكة في 200 ملليلتر من ماء العدوى المعقم لمدة خمس دقائق. بعد خمس دقائق، مرر هذا الماء عبر شبكة صيد، وتخلص من الماء بالمبيض الصناعي. الآن، يمكن للسمكة الدخول إلى كأس نظيف جديد يحتوي على 200 ملليلتر من ماء العدوى المعقم.