موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 2:47 دقيقة • March 31st, 2026
ابدأ بفأر مخدر وظهره محلوق.
ضع الفأر بغطاء صحن بتيري تحت بطنه للحفاظ على ظهر الظهر أفقيا.
اغمر قطعة نحاسية في كأس يحتوي على ماء مغلي حتى تسخن.
وفي الوقت نفسه، أعطني مسكن الألم عن طريق الحقن تحت الجلد.
ثم اضغط الكتلة النحاسية المسخنة على ظهر الفأرة المحلوقة.
تتلف الحرارة الطبقة الخارجية للجلد، وهي البشرة، وتنتشر إلى الأنسجة الأساسية، مما يخلق جرح حرق.
أزل الكتلة وحقنها محلول ملحي تحت الجلد لمنع الجفاف.
بعد ذلك، ضع لقاح من البكتيريا الممرضة معلقة في حاجز مائي.
استخدم مسحة قطنية معقمة لتوزيع البكتيريا بشكل متساو على الجرح.
تلتصق البكتيريا بمستقبلات الخلايا باستخدام البروتينات السطحية، وتبدأ الاستعمار، وتشكل طبقة حيوية واقية، وتؤسس عدوى موضعية.
هذا النموذج الفأري لعدوى الحروق جاهز لدراسات تفاعل المضيف مع الممرض.
بعد تخدير الفأرة، وفقا لبروتوكول النص، استخدم مقص شعر ب 50 شفرة لحلاقة الفأرة على ظهرها لكشف أكبر قدر ممكن من الجلد. ثم ضع غطاء طبق بتري 35 ملم تحت بطن الفأر للحفاظ على الظهر في وضع أفقي نسبيا.
استخدم لوحة تسخين بحجم 10 إنش × 10 إنش و220 فول تيار متردد لغلي الماء في كأس بسعة 150 ملليتر. اغمر كتلة نحاسية في الكأس حتى يتم تحقيق التوازن الحراري مع الماء. قبل إحداث إصابة الحروق، أعط حقنة تحت الجلد من مسكنات الألم الاستباقية لتخفيف الألم.
بعد عشر دقائق، وأثناء ارتداء قفازات حرارية، اضغط بلطف على الكتلة النحاسية المسخنة على المنطقة المحلوقة في ظهر الفأر لمدة سبع ثوان لإحداث جروح حروق. أعط 0.5 ملليلتر من محلول ملحي معقم عبر حقن تحت الجلد. بعد خمس دقائق من تحفيز الإصابة الحرارية، استخدم ماصة لتلقيح 50 ميكرولتر من التعليق البكتيري يحتوي على 5 مرات 10 إلى سادس وحدة CFU في PBS على حروق الفأر.
ثم، بتحريك مسحة قطنية معقمة بحركة متعرجة على الجلد، قم بمسح الأليكوت على الحروق لتوزيع الخلايا البكتيرية في المنطقة المحترقة بأكبر قدر ممكن من التساوية.