JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدات • 2:40 د • March 31st, 2026
ابدأ بفأر مخدر مع غطاء صحن بتري تحت بطنه للحفاظ على ظهره أفقيا.
يظهر على الفأر جرح حرق في ظهره أصيب بعدوى Acinetobacter baumannii، وهو ممرض بكتيري سالب جرام.
تم تعديل البكتيريا وراثيا لحمل أوبيرون التلألؤ الحيوي.
ضع الفأر داخل غرفة تصوير التوهج الحيوي التي تحافظ عليها عند درجة حرارة مثالية وابدأ في التصوير.
في موقع العدوى، تقوم جينات luxA و luxB في أوبرون التلألؤ الحيوي بترميز إنزيم اللوسيفيراز. جينات luxCDE تشفر إنزيمات تصنع ركيزة اللوسيفيراز.
يحفز لوسيفراز أكسدة الركيزة وينتج ضوءا مرئيا، مما يجعل البكتيريا متوهجة.
تشير إشارة التوهج الحيوي إلى وجود بكتيريا نشطة أيضيا في موقع الجرح.
باستخدام برامج التصوير، قم بقياس شدة إشارة التلألؤ الحيوي لتقدير الحمل البكتيري القابل للحياة.
مباشرة بعد التطعيم، قم بإجراء تصوير التلألؤ الحيوي عن طريق تشغيل برنامج التصوير الحي. في لوحة التحكم، اضغط على تهيئة. ثم انتظر حتى يتحول لون صندوق درجة الحرارة إلى اللون الأخضر، مما يشير إلى أن درجة حرارة المرحلة في غرفة العينة وصلت إلى 37 درجة مئوية.
ضع الفأر المخدر على المرحلة الدافئة في غرفة العينة مع الحروق المصابة مباشرة تحت الكاميرا. بعد ذلك، في لوحة التحكم، ضع علامة تحقق بجانب "التواصل".
ثم اختر "التعريض التلقائي" بحيث يتم تحسين وقت التعريض للتصوير بواسطة برنامج التصوير الحي بناء على شدة التلمع الحيوي. اختر "C" من قائمة "مجال الرؤية" المنسدلة. اختر خيار المسح المتوسط للسماح للبرنامج بتحديد المسافة البؤرية.
ثم ضع علامة تحقق بجانب التراكب الداخلي. الآن، اضغط على "اقتناء" لالتقاط الصورة. ثم، في مربع "تحرير تسمية الصورة"، اضغط موافق. ستظهر "نافذة الصورة" و"لوحة الرسوم". اضبط معلمات العائد التلقائي للاختيار التلقائي.