موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 2:52 دقيقة • March 31st, 2026
ابدأ بفأر مخدر وظهره مكشوف، موضوع على غطاء صحن بتري.
الفأر لديه جرح حرق ملوث ببكتيريا مضيئة حيوية مقاومة للأدوية.
غط عيني الفأر بورق الألمنيوم لتجنب التعرض المفرط للضوء الأزرق.
ضع الفأرة تحت جهاز LED أزرق على مسافة ثابتة.
إشعاع الجرح بشدة ثابتة. زد وقت التعرض لتقديم جرعات أعلى.
يخترق الضوء نسيج الجرح ويصل إلى البكتيريا المستعمرة.
داخل هذه البكتيريا، تمتص الجزيئات الحساسة للضوء الضوء الأزرق وتصبح مفعلة ضوئيا، مما ينتج أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS).
تتلف ROS المكونات البكتيرية، بما في ذلك البروتينات المضيئة حيويا، مما يؤدي إلى موت الخلايا البكتيرية مع ضرر بسيط للأنسجة المحيطة.
بعد كل تعرض، قم بإجراء تصوير التلميض الحيوي لمراقبة قدرة البكتيريا على البقاء حول الجرح.
مع زيادة الجرعة، تنخفض الإشارة بشكل متناسب.
يشير هذا الانخفاض إلى التأثير المضاد للبكتيريا للإجهاد التأكسدي الناتج عن الضوء الأزرق.
بعد تخدير الفئران، وفقا لبروتوكول النص، قسم الحيوانات عشوائيا إلى مجموعة ضوء أزرق مضاد للميكروبات أو مجموعة مضادة للميكروبات أو مجموعة تحكم غير معالجة. بالنسبة للمجموعة المعالجة ب aBL، استخدم ورق الألمنيوم لتغطية عيون الفئران لتجنب التعرض المفرط للضوء. ضع حروق الفأر مباشرة تحت LED مع غطاء طبق بتري 35 ملم تحت بطن الفأر للحفاظ على الظهر في وضع أفقي.
بعد ذلك، استبدل مقياس الطاقة بفأر على طبق بتري مربع. ثم أعد ضبط ارتفاع الفأرة إلى موضع تكون فيه المسافة بين فتحة LED وسطح حرق الفأر مساوية للمسافة بين فتحة LED وحساس الضوء في مقياس طاقة الطاقة. تشعيع الحروق المصابة بإشعاع 100 ميلي واط لكل سنتيمتر مربع.
توصيل aBL بمقدار 72 جول لكل سنتيمتر مربع حتى يتم الوصول إلى الجرعة الإجمالية 360 جول لكل سنتيمتر مربع. بعد كل جرعة ضوئية، قم بتصوير الإضاءة الحيوية لحروق الفأر، كما هو موضح سابقا في هذا الفيديو. بالنسبة لمجموعة الضابط غير المعالجة، قم بإجراء تصوير تلألؤ حيوي لحروق الفئران باستخدام نفس الفترات الزمنية المستخدمة في المجموعة المعالجة ب aBL.