تأسيس الأغشية الحيوية البكتيرية والفطرية العابرة للمملكة لدراسة مسببات الأمراض الفموية

ابدأ بزراعة بكتيريا الممرضة الفموية Streptococcus mutans، وCandida albicans، وهو ممرض فطري انتهازي.

انقل المستعمرات المعزولة إلى وسط غني بالمغذيات وحضن الحوض طوال الليل لضمان النمو النشط.

جهاز طرد مركزي لتفجير الخلايا. قم بإزالة المادة الفائقة وإعادة تعليق الخلايا في محلول ملحي معقم إلى تركيز محدد.

خذ صفيحة متعددة الآبار مغطاة بمحلول لعاب بشري لمحاكاة بيئة الفم.

أضف C. albicans وحضانة للسماح بالالتصاق بطبقة اللعاب. اغسله بمحلول ملحي معقم لإزالة الخلايا غير الملتصقة.

أضف مصلا غير منشط بالحرارة وقم بالحضانة لتحفيز تطور الشعر. اغسل المصل الزائد.

أدخل S. mutans، ثم وسط غني بالسكروز واحتضن. يفرز S. mutans إزيم الجلوكوزيل ترانسفيراز، الذي يرتبط ب C. albicans manans.

يقوم هذا الإنزيم بتحفيز السكروز إلى جلوكان على سطح الفطريات، مما يثبت البكتيريا في الخيوط ويعزز التكاثر وتكوين المصفوفة.

تنتج هذه الطريقة أغشية حيوية عبر المملكة تمثل التآزر الميكروبي في المرض الفمومي.

ننمو S. mutans وC. albicans على صفائح الأجار الدموية عند درجة حرارة 37 درجة مئوية تحت ظروف هوائية.

ثم نقل مستعمرات فردية لكل كائن إلى أنابيب اختبار مملوءة ب5 ملليلتر من حقن القلب في الدماغ، ونموها لمدة 18 ساعة إضافية.

في اليوم التالي، قم بطرد المركزي بالثقافات بقوة 1200 مرة في الغرام لمدة خمس دقائق وتخلص من السوبرناتانت. أعد تعليق الخلايا