موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 2:51 دقيقة • February 26th, 2026
ابدأ بلوحة متعددة الحفر تحتوي على خلايا ظهارية سرطانية ملتصقة على غطاء داخلي.
أضف شيجيلا فليكسنيري، وهي بكتيريا ممرضة.
قم بعمل طرد مركزي على الصفيحة لتعزيز اتصال البكتيريا مع الخلايا، ثم حضنها.
باستخدام نظام إفراز متخصص، يحقن شيجيلا بروتينات الضراوة في الخلايا الطهارية.
تقوم هذه البروتينات الضراوة بتعديل نظام الإشارات الظهارية، مما يسهل امتصاص البكتيريا.
داخل الخلايا، تستمر البكتيريا في إفراز بروتينات الضراوة، التي تعطل الترجمة الخلوية وتتراكم mRNA غير مترجمة.
تتجمع بروتينات الربط والإشارة بالرنا مع ال mRNA غير المترجمة، مكونة حبيبات سيتوبلازم بدون غشاء تعرف بحبيبات الإجهاد.
تخلص من الوسط واغسل لإزالة البكتيريا غير المتصلة.
بعد ذلك، أضف وسط زراعة مسبق التسخين مع جينتامسين للقضاء على البكتيريا المرتبطة بالسطح.
أضف مثبتا للحفاظ على الهياكل الخلوية والحبيبات المجهدة.
تخلص من المثبت واغسل بهز لطيف لإزالة المثبت المتبقي.
الخلايا جاهزة للتلوين بالفلورة المناعية لرؤية حبيبات الإجهاد الناتجة عن شيجيلا.
استبدل الغسيل ب 500 ميكرولتر من وسط العدوى لكل بئر، وقم بعمل طرد مركزي على لوحة 24 بئر لتدوير البكتيريا على الخلايا.
انقل الزراعة البكتيرية المشتركة المستقرة إلى حاضنة زراعة الأنسجة بدرجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة لتسهيل عدوى الخلايا المضيفة.
في نهاية الحضانة، قم بإزالة البكتيريا الخارجية من الخلا
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية