JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدات • 2:25 د • March 31st, 2026
ضع أنابيب تفاعل البوليميراز المتسلسل أو أنابيب PCR التي تحتوي على أقراص جاهزة لعلاج PCR الخاصة بمسببات الأمراض المنقولة غذائية المستهدفة على رف أنابيب PCR مبرد.
يحتوي كل قرص على برايمرات محددة للهدف، وبوليميراز DNA، وdNTPs، وصبغة فلورية مستخدمة في تفاعل PCR.
أضف ليزات الذباب المخصب الذي يحتوي على كمية عالية من الحمض النووي من البكتيريا الممرضة لتشكيل خليط التفاعل.
أغلق الأنابيب بأغطية بصرية لمنع التبخر.
تحميل أنابيب PCR في جهاز الدورة الحرارية وإجراء عمليات PCR منفصلة باستخدام برامج خاصة بكل ممرض لكل ممرض مستهدف.
خلال عملية PCR، يتغير الحمض النووي، وترتبط البادئات بالتسلسل المستهدف، وينتج التضخيم DNA مزدوج السلسلة يرتبط بالصبغة ويصدر فلورة.
تؤدي الدورات المتكررة إلى تضخيم أسي للحمض النووي وزيادة التألق.
يتتبع الجهاز التألق في الوقت الحقيقي للكشف عن وجود مسببات الأمراض المنقولة عن طريق الغذاء المستهدفة في العينة.
لبدء الكشف المعتمد على PCR، أولا، قم بتبريد رف أنبوب PCR على كتلة تبريد. ثم ضع أنابيب PCR المقابلة التي تحتوي على أقراص جاهزة للعلاج بمثابة الممرض المنقول عن طريق الغذاء في الحامل.
قم بإزالة الأغطية بعناية من أنابيب PCR باستخدام أداة التنظيف وتخلص منها. تحقق من أن كل أنبوب يحتوي على قرص لوحي. ثم انقل 50 ميكرولتر من اللايزات إلى أنابيب PCR المناسبة.
ثبت أغطية بصرية جديدة على أنابيب PCR باستخدام أداة التغطية. بعد تجميع التفاعلات، قم بتحميل أنابيب PCR في نظام كشف دورة PCR. ثم شغل البرنامج وعرض النتائج كما هو موضح في بروتوكول الشركة المصنعة.
يوضح هذا البروتوكول استخدام تقنية PCR للكشف عن الممرضات المنقولة بالغذاء من عينات الذباب المخصبة. وتكمن أهمية هذا الإجراء في تعزيز سلامة الغذاء من خلال تمكين التحديد السريع للممرضات.
تتيح هذه الطريقة القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) الكشف السريع والحساس عن الممرضات المنقولة بالغذاء من عينات الذباب المخصبة، مما يدعم تقييم المخاطر في المراحل المبكرة ضمن تدفقات عمل سلامة الأغذية. ومن خلال توفير قراءات فلورية في الوقت الحقيقي وتضخيم نوعي للممرضات، تعزز هذه الطريقة الثقة التنبؤية في تحديد مصادر التلوث. كما يدعم هذا النهج تقليل المخاطر الآلية من خلال ربط المراقبة البيئية بوجود الممرضات، مما يوجه قرارات الاستمرار أو التوقف في أبحاث سلامة الأغذية قبل السريرية والترجمية.
تندرج هذه الطريقة ضمن مراحل الاكتشاف المبكر وصولاً إلى مراحل تحديد المركبات الواعدة، حيث يساهم الكشف عن المسببات المرضية البيئية في التحقق من صحة الهدف الجزيئي ومدى جاهزية المقايسة لحملات الفحص اللاحقة.
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
آخر تحديث: 29 أغسطس 2026