JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدات • 1:45 د • February 26th, 2026
خذ عمليات تجميد الأنسجة من السيكوم، وهي منطقة في الأمعاء الغليظة. أحد الأقسام هو من فأر مصب فقط بكلوستراديويديس ديفيسيلي. القسم الآخر من فأر أصيب معا بعدوى C. difficile وEnterococcus faecalis.
في النسيج المصاحب المصاب، يقوم E. faecalis بعملية الأرجينين المضيف ويطلق الأورنيثين. يمتص C. difficile هذا الأورنيثين، مما يعزز إنتاج السموم المرتبطة بالنمو وتلف الأنسجة.
لتحليل هذه العينات باستخدام تصوير MALDI، تطبيق طبقة موحدة من محلول المصفوفة.
تحميل الشرائح في مطياف الكتلة MALDI، حيث يقوم الليزر بمسح الأنسجة، مؤينة الأحماض الأمينية عبر المصفوفة.
تحميل الشرائح في مطياف الكتلة MALDI، حيث يقوم الليزر بمسح الأنسجة، مؤينة الأحماض الأمينية عبر المصفوفة.
يتم فصل الأيونات الناتجة بنسبة الكتلة إلى الشحنة ويتم اكتشافها بواسطة الجهاز لإنشاء خرائط مكانية لتوزيع الأحماض الأمينية.
يظهر النسيج المصاب معا مستويات أرجينين أقل ومستويات أورنيثين أعلى من العينة المصابة أحادية، مما يدعم المرض المدفوع بالتعاون الميكروبي في C. difficile .
قم بتنفيذ تطبيق مصفوفة MALDI ومطياف الكتلة التصويرية كما أوضح سابقا.
تحليل صور الأيونات من عدة نسخ بيولوجية، وقارن النتائج للحصول على دلالة من خلال مقارنات مخطط صندوق الشدة باستخدام برنامج SCiLS الإحصائي.