موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 3:03 دقيقة • March 31st, 2026
خذ مزرعة بكتيرية قادرة على إصابة أنسجة الأوراق.
قم بكشط المستعمرات وعلق في محلول ملحي.
قس الكثافة البصرية لتقييم تركيز البكتيريا، ثم تخفيفه إلى الكمية المطلوبة من الكثافة الزائدة.
قم بتخفيفات متسلسلة للوصول إلى التركيز النهائي لللقاح.
أضف مادة فعالة لتقليل التوتر السطحي وضمان انتشار البكتيريا بشكل متساو على الورقة.
انقل التعليق إلى طبق بتري.
بعد ذلك، ضع عصوين خشبيين على قمة وعاء الأرابيدوبسيس .
اقلب النبات فوق الطبق، واغمس الأوراق في التعليق.
ضع الإعداد في غرفة تفريغ وطبق نبضة تفريغ
يقوم الفراغ المطبق بإزالة الهواء من نسيج الورقة عبر فتحات طبيعية.
إطلاق الفراغ يعيد الضغط الجوي، مما يجبر البكتيريا على الدخول إلى الأوراق.
كرر النبضات لتحقيق أقصى تسرب ممكن.
أزل الوعاء. ثم قم بمسح اللقاح الزائد.
أوراق الأرابيدوبسيس المصابة بالبكتيريا جاهزة للتحليل في المرحلة اللاحقة.
انقل مخزون الجلسرون من سلالة Pseudomonas syringae محل الاهتمام من ناقص 80 درجة مئوية إلى طبق LB مغطى بالمضادات الحيوية المناسبة. حضن الطبق عند 28 درجة مئوية لمدة 40 إلى 48 ساعة. اكشط الكتلة الحيوية البكتيرية وأعد تعليقها في خمسة ملليلتر من كلوريد المغنيسيوم بوزن 10 ملليمولات.
قس الكثافة البصرية عند 600 نانومتر وضبطها إلى 0.1 بإضافة كلوريد المغنيسيوم بقيمة 10 ملليمولات. قم بتخفيفات متسلسلة في كلوريد المغنيسيوم بحجم 10 ملليمولات للحصول على
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية