Name: تشريح الإنسان عناصر الجسم الزجاجي لتحليل البروتين (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-01-23T17:45:00.000+00:00
Duration: 5 min 5 s
Description: تعلم تقنيات تشريح الجسم الزجاجي البشري لتحليل البروتين في أبحاث طب العيون. يوضح هذا الفيديو طرق عزل الهيالويد الأمامي وقاعدة الجسم الزجاجي بدقة لضمان سلامة العينات.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

وقدم التمويل من جانب النضال من أجل البصر. تم الحصول على أنسجة العين من ولاية ايوا البنك الليونز.

1. الجزء الأمامي للتشريح. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم إزالة القرنية عن طريق شق أولا في حوف في الغرفة الأمامية باستخدام شفرة 15 درجة (الشكل 1). ثم يتم إدخال شفرة واحدة من مقص القرنية الصلبة ، منحنية في الغرفة الأمامية. يتم إجراء تخفيضات كفافي في القرنية ، الأمامي فقط لحوف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وتستخدم 0.12 COLIBRI ملقط ومقص يستكوت لقطع القزحية الأمامي circumferentially إلى الجسم الهدبي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم إزالة نواة العدسة مع ملقط COLIBRI 0.12 أو 15 درجة شفرة (supersharp) والقشرة وكبسولة بالملقط. </li></ol> 2. الزجاجي الأساسية الطموح. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم إدخال إبرة عيار 23 على حقنة 5 سم مكعب في منتصف الزجاجي (الشكل 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويستنشق حوالي بلطف 1 مل أو أكثر من جوهر الزجاجي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم يتم وضع العينة في أنبوب microfuge ثم في النيتروجين السائل. </li></ol> 3. تشريح الجسم الزجاجي الأمامي. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وينظر في الجسم الزجاجي الأمامي وحلقة شبه شفافة من خلال تعديل على ضوء الحادث من مجهر الضوء أوزة الرقبة. الطموح السابقة من صميم زجاجي يفصل بين الجسم الزجاجي الأمامي من الهياكل الأخرى لتسهيل عملية تحديد الهوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم سحبها بعناية ورقة من الأنسجة المرنة بعيدا عن الجسم الهدبي مع COLIBRI أو ملقط خلع الملابس وقطع مع مقص Vannas. يتم تكرار هذه المناورة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم يتم وضع العينة في أنبوب microfuge ثم في النيتروجين السائل. </li></ol> 4. الزجاجي قاعدة تشريح. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام الملقط 0.12 لتحقيق الاستقرار في كوب العين ، ويتم استخدام مقص يستكوت الى "زهرة" للعين عن طريق صنع اربع فترات متساوية تخفيف الإجهاد تخفيضات من الجسم الهدبي نحو الرأس العصب البصري. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تتم إزالة الجزء ذو ثنيات الجسم الهدبي (الشكل 2) من كل من الأرباع باستخدام مقص يستكوت. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم يتم اغتنامها قاعدة الزجاجي على جانبي مشرشر ORA مع ملقط على مسطح بارس وشبكية العين (الشكل 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم تطبيق الجر المستمر على قاعدة الزجاجي مع ملقط. قطع متسلسلة مع مقص يستكوت مقتطفات نسيج شبه شفافة مع ظهور "سلسلة من اللؤلؤ" كما هو مفروض ضريبة عليه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم يتم وضع العينة في أنبوب microfuge ثم في النيتروجين السائل. </li></ol> 5. الزجاجي إزالة القشرة. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يستأصل فيه مسطح الجزء من كل من الأرباع مع مقص يستكوت بقطع النشرة حوالي 3 ملم الخلفي للمشرشر أورا (الشكل 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بين منشورات الأنسجة ، والقشرة الزجاجية كما هو تصور فيلم شبه شفافة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> هو أدرك أن الفيلم إما مرونة مع 0.12 ملقط أو تحتجزهم التمسك اسفنجة ويك - سيل الجراحية. ثم يتم سحبها القشرة الزجاجية بعيدا عن شبكية العين ورفعه مع مقص يستكوت (الشكل 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم وضع العينة في أنبوب microfuge ثم إلى النيتروجين السائل. يتم تخزين جميع العينات في -80 درجة مئوية لحين الاستفادة منها للتجريب. </li></ol> 6. ممثل النتائج يمكن معالجة عينات الأنسجة من جانب مجموعة متنوعة من الأساليب لتجارب معينة. في حالتنا ، وقدمت عينات للتحليل البروتين بواسطة SDS - PAGE (الشكل 3). <img src="/files/ftp_upload/2455/2455fig1.jpg" alt="الشكل 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="الشكل 1"> الشكل 1. مستعرضة رأي العين البشرية تصور الأساسات مختلفة من الجسم الزجاجي ، ومعظم الزجاجي الأمامي هو طبقة رقيقة تسمى كولاجيني الزجاجية الأمامية. جوهر الزجاجي تشمل المنطقة بأسرها المركزية من الجسم الزجاجي. هذا الجزء من الجسم الزجاجي هو أكثر مائي على النقيض من قاعدة الزجاجي ، وهو ما يكفي للزج يجب اغتنامها بواسطة ملقط ويرد بحزم على الجسم الهدبي الكامنة وشبكية العين. تشمل جوهر الزجاجي هو قشرة رقيقة جدا كولاجيني يسمى القشرة الزجاجية. <img src="/files/ftp_upload/2455/2455fig2.jpg" alt="الشكل 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="الشكل 2"> الشكل 2. تشريح الجسم الزجاجي قاعدة ، وقاعدة الزجاجي هو طيدة شبه شفافة من الجسم الزجاجي الموجود على طول مشرشر أورا (السهام البيضاء) ، والذي هو خط فاصل يفصل بين الجسم الهدبي والشبكية. الحدود الأمامية للقاعدة زجاجي مسطح تمتد على الجزء (الخط الأبيض) من الجسم الهدبي. الحدود الخلفي من قاعدة زجاجي يمتد 2-3 ملم الخلفي للمشرشر أورا (اندفاعة بيضاء). لاستئصال القاعدة الزجاجية ، وتستخدم لفهم ملقط الأنسجة وتسحبه بعيدا عن الجسم الهدبي وراء شبكية العين. وتستخدم مرة واحدة مرتفعة ، مقص لقطع يستكوت على طول القاعدة. <img src="/files/ftp_upload/2455/2455fig3.jpg" alt="الشكل 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="الشكل 3"> الشكل 3. أحادية البعد SDS - PAGE من عناصر الجسم الزجاجي. تركيزات البروتين الكلي للالزجاجية الأمامية ، وقاعدة زجاجي ، فيتامينوreous الأساسية ، والقشرة الزجاجية 11.24 ، 20.1 ، 16.61 ، 14.24 ملغ / مل ، على التوالي. تم تنفيذ الكهربائي للهلام في 200 كيلو فولت لمدة 45 دقيقة ، ملون مع فلامينغو (بيو راد) ، وتصور باستخدام التصوير VersaDoc النظام (بيو راد). لمحات عن الأنسجة المختلفة تظهر عصابات مماثلة عدة ، مما يدل إما الحفظ أو عبر تلويث البروتينات ، فضلا عن العصابات فريد (النجمة) ، مشيرا الى البروتينات المترجمة تفاضليا.

<ol><li>Bishop, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+macromolecules+and+supramolecular+organisation+of+the+vitreous+gel%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Structural macromolecules and supramolecular organisation of the vitreous gel.</a> Prog Retin Eye Res. 19, 323-344 (2000).</li>
<li>Sebag, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+biology+of+pharmacologic+vitreolysis%5BTitle%5D)+AND+%22Trans+Am+Ophthalmol+Soc%22%5BJournal%5D)">Molecular biology of pharmacologic vitreolysis.</a> Trans Am Ophthalmol Soc. 103, 473-494 (2005).</li>
<li>Yoshimura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+analysis+of+inflammatory+immune+mediators+in+vitreoretinal+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Comprehensive analysis of inflammatory immune mediators in vitreoretinal diseases.</a> PLoS One. 4, e8158-e8158 (2009).</li>
<li>Gao, B. B., Chen, X., Timothy, N., Aiello, L. P., Feener, E. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+vitreous+proteome+in+diabetes+without+diabetic+retinopathy+and+diabetes+with+proliferative+diabetic+retinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Proteome+Res%22%5BJournal%5D)">Characterization of the vitreous proteome in diabetes without diabetic retinopathy and diabetes with proliferative diabetic retinopathy.</a> J Proteome Res. 7, 2516-2525 (2008).</li>
<li>Izuta, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+SOD+and+VEGF+are+increased+in+vitreous+bodies+from+proliferative+diabetic+retinopathy+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Vis%22%5BJournal%5D)">Extracellular SOD and VEGF are increased in vitreous bodies from proliferative diabetic retinopathy patients.</a> Mol Vis. 15, 2663-2672 (2009).</li>
<li>Azimzadeh, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Formalin-fixed+paraffin-embedded+%28FFPE%29+proteome+analysis+using+gel-free+and+gel-based+proteomics%5BTitle%5D)+AND+%22J+Proteome+Res%22%5BJournal%5D)">Formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) proteome analysis using gel-free and gel-based proteomics.</a> J Proteome Res. 9, 4710-4720 (2010).</li>
</ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

الجسم الزجاجي هو مادة هلامية شبه شفافة الجزيئية التي يتم تكوينها غير مفهومة ، لا سيما على مستوى الأساسات وهي : قاعدة الزجاجي ، الأساسية ، والقشرة ، والزجاجية الأمامية. جوهر زجاجي يحتوي collagens الثاني والخامس والتاسع ، والحادي عشر ، جنبا إلى جنب مع البروتيوغليكان كبريتات شوندروتن ، والبروتيوغليكان كبريتات heparan وhyaluronan. بروتين 1،2 المؤشرات الحيوية الأساسية في الجسم الزجاجي ارتبطت بأمراض مثل اعتلال الشبكية السكري. 3-5 كيف يتم التعبير عن هذه البروتينات بشكل مختلف في كل من الأساسات ، وفي كثير من الحالات لا يعرف هويات بروتين معين. قد تعطي هذه التفاصيل البصيرة إلى الأصل من البروتينات المرتبطة بالأمراض الشبكية محددة ومساعدة في المستقبل العلاجات المستهدفة. على الرغم من أنه لم يكن الفاصل الزمني الأمثل لتشريح الجثة بعد الوفاة تحديد الأنسجة ، قد تدهور البروتين يؤثر على التجارب المصب. على سبيل المثال ، يتأثر المناعية في العيون بعد الوفاة لمدة 12 ساعة ويمكن تخفيض بعض الأنشطة انزيم معين في غضون ساعات قليلة (المراقبة غير منشورة). وقد جمعت جميع الأنسجة في هذه الدراسة ما بين 2 و 8 ساعات من وفاة دون تغييرات كبيرة في التعبير عن البروتين أو صلاحيتها للanalsyis البروتيوميات. يتم اختيار تجميد النيتروجين السائل أكثر من طريقة لتثبيت الحفظ من أجل منع إجراء تغييرات صغيرة في بنية البروتينات التي تسببها عبر ربط تثبيتي ، والذي تجلى في الأنسجة الأخرى التي LC-MS/MS. 6 والدراسات البروتين تعتمد على القدرة على الدقة تشريح المقصورات مختلفة من الجسم الزجاجي ، كما تجلى في هذه التجربة الفيديو. لقد قمنا التحقق باستخدام تقنية تشريح 1 الابعاد SDS - PAGE. كما تشير نتائجنا ، وهناك وأعرب تفاضلي البروتينات في الجسم الزجاجي الأساسات المختلفة. وسوف تحدد هذه البروتينات توفير فهم أكثر تفصيلا من التقسيم الزجاجي.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم </td><td> شركة </td><td> رقم كتالوج </td></tr><tr><td> 0.12 ملقط </td><td> STORZ Ophthalmics </td><td> E1502 </td></tr><tr><td> 5 سم حقنة </td><td> بيكتون ديكنسون ، </td><td> 309603 </td></tr><tr><td> مستقيم الملقط خلع الملابس مع التسنين </td><td> STORZ Ophthalmics </td><td> E1400 </td></tr><tr><td> إبرة قياس 23 </td><td> بيكتون ديكنسون ، </td><td> 305145 </td></tr><tr><td> COLIBRI ملقط </td><td> STORZ Ophthalmics </td><td> 2 / 132 </td></tr><tr><td> مقص Castroviejo القرنية الزاوية </td><td> STORZ Ophthalmics </td><td> E3223 </td></tr><tr><td> Vannas منحني مقص محفظة </td><td> STORZ Ophthalmics </td><td> E3387 </td></tr><tr><td> ويك ، سل الرماح الجراحية </td><td> ميدترونيك </td><td> 0008680 </td></tr><tr><td> مقص منحني يستكوت بضع الوتر </td><td> STORZ Ophthalmics </td><td> E3320 </td></tr></tbody></table>

تشريح الإنسان عناصر الجسم الزجاجي لتحليل البروتين

Dissection of Human Vitreous Body Elements for Proteomic Analysis

والزجاجي هو ، كولاجيني واضحة بصريا المصفوفة خارج الخلية التي تملأ داخل العين ويعتلي الشبكية. الشاذ 1،2 التفاعلات بين الأساسات الزجاجي والشبكية وراء أمراض الشبكية عدة ، بما في ذلك المسيل للدموع وانفصال الشبكية ، تجعد البقعة الصفراء ، الثقب البقعي ، سن المتصلة تحلل البقعة الصفراء vitreomacular الجر ، vitreoretinopathy التكاثري ، اعتلال الشبكية السكري التكاثري ، وvitreoretinopathies الموروثة ، 1،2 ولا يعرف التركيب الجزيئي للالأساسات الزجاجي. لأن الجسم الزجاجي شفافا مع وصول جراحية محدودة ، فقد كان من الصعب دراسة الأساسات على المستوى الجزيئي. طورنا طريقة لفصل والحفاظ على هذه الأنسجة للتحليل البروتين والبيوكيميائية. تقنية التشريح في هذا الفيديو التجريبية تبين كيفية عزل القاعدة الزجاجية ، الزجاجية الأمامية ، الزجاجي الأساسية ، والقشرة الزجاجية من عيني بعد الوفاة الإنسان. وأظهر أحد الأبعاد SDS - PAGE تحليل كل عنصر زجاجي أن أسلوبنا تشريح أدى في أربعة ملامح البروتين فريد المقابلة لكل طيدة من الجسم الزجاجي الإنسان. سوف تحديد البروتينات مجزأة تفاضليا تكشف مرشح جزيئات الأمراض الكامنة الشبكية المختلفة.

هذا الفيديو يظهر تقنية فعالة للتمييز وتشريح مختلف هياكل شبه شفافة من الجسم الزجاجي في العين البشرية بعد الوفاة.

يعد الجسم الزجاجي مصفوفة خارج خلوية كولاجينية شفافة بصرياً تملأ الجزء الداخلي من العين وتغطي الشبكية. 1,2 تؤدي التفاعلات غير الطبيعية...

الجسم الزجاجي هو مادة خلوية خارجِيّة شفافة بصرياً تملأ تجويف العين. ويمكن تقسيمه إلى عدة بنيات فرعية، بما في ذلك الغشاء الزجاجي الأمامي خلف العدسة، وقاعدة الجسم الزجاجي عند الشبكية الأمامية، وقشرة الجسم الزجاجي التي تشكل غلافاً مرناً، ونواة الجسم الزجاجي في المركز. ولتشريح الجسم الزجاجي، نحتاج أولاً إلى إزالة الجزء الأمامي من العين.تُستخدم شفرة حادة للغاية لإجراء شق في القرنية عند الليمبوس (الحافة). بعد ذلك، تُستخدم مقصات القرنية والصلبة لقص القرنية في المنطقة الأمامية مباشرة من الليمبوس. ثم يتم تشريح القزحية باستخدام مقصات منحنية عن طريق سحبها من سطحها.يمكن للضغط الخفيف على المقلة أن يؤدي إلى طرد النواة. ولإزالة اللب الزجاجي، استخدم إبرة قياس 23 على حقنة سعة 5 cc وقم بشفط الجسم الزجاجي السائل في الغالب. ويصبح الغشاء الزجاجي الأمامي مرئياً كبنية غشائية شفافة ورقيقة يمكن الإمساك بها باستخدام الملقط.إنها بنية مرنة تقع خلف العدسة مباشرة. الدائرة الداخلية هي الرباط المربوط. تُستخدم مقصات "فان" لقطع الجسم الزجاجي بينما يتم تطبيق الشد بواسطة الملاقط.يمكن نقل أنسجة الجسم الهدبي إلى أنبوب afu وتكرار المناورة حتى يتم تشريح جميع الأنسجة. وللوصول إلى الهياكل الفرعية المتبقية من الجسم الزجاجي، من الضروري فتح العين باستخدام مقصات westcott المنحنية. يتم إبعاد كل من السدائل باستخدام الملاقط في طبق بتري.توضح هذه الصورة تشريح قاعدة الجسم الزجاجي، وهي نسيج رقيق وشفاف يمتد فوق ora serrata. وتعتبر ora serrata الخط الفاصل بين الجسم الهدبي أمامياً والشبكية خلفياً. وبخلاف الأجزاء الأخرى من الجسم الزجاجي، تلتصق قاعدة الجسم الزجاجي بقوة بالجسم الهدبي والشبكية الكامنين تحتها، لذا فإن السحب باستخدام الملقط سيؤدي في الواقع إلى رفع النسيج.لعزل قاعدة الجسم الزجاجي، نقوم أولاً بإزالة الجزء المسطح (pars plata) باستخدام الملقط ومقص ويسكوت. الجزء المسطح هو هذه المنطقة الصغيرة ذات النتوءات. بعد ذلك، ولعزل قاعدة الجسم الزجاجي، يتم القص على بُعد مليمتريْن إلى ثلاثة مليمتراّت خلف الهالة (ora) باستخدام مقص ويسكوت مع تثبيت العين بالملقط، ثم يتم الإمساك بقاعدة الجسم الزجاجي وشدّها باستخدام الملقط والقص تتابعياً باستخدام مقص ويسكوت.يظهر مظهر يشبه سلسلة من اللآلئ عند استئصال قاعدة الجسم الزجاجي، ويمكن ملاحظة كيف يمكن لهذه المادة الخلالية خارج الخلوية أن تقسم البروتينات إلى حجرات. يمكن استخدام تقنيات مختلفة لتشريح غلاف الجسم الزجاجي. كما سيؤدي التلامس مع إسفنجة خلايا WEX إلى رفع القشرة.يمكن العثور على حافة من القشرة بين الوريقات كما هو موضح هنا. ومرة أخرى، استخدم الملقط لإحداث شد، واستخدم مقص VanNess لقص القشرة الزجاجية بشكل تتابعي. يمكن أيضاً رفع القشرة عن القرص، وهنا تُستخدم مقصات westcot الأكبر لتشريح القشرة أثناء تقشيرها بعناية عن سطح الشبكية.يمكن بعد ذلك وضع العينات في أنبوب ميكرو وتخزينها لإجراء تحليل بروتيومي لاحقاً.

dissection-of-human-vitreous-body-elements-for-proteomic-analysis

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

الرئيسيات غير البشرية هي الأنواع الهامة متعدية لفهمنا للتنمية ، والشيخوخة. يجوز للمنظمة التشريحي للشبكية الرئيسيات توفير معلومات هامة في الظروف العادية والمرضية لدى البشر.

عبارة في الدماغ : تشريح العين الرئيسيات

تقنية يوضح تشريح استئصاله من الجسم الزجاجي والشبكية ، وعدسة العين من الماوس ، والفصل عن طريق الطرد المركزي ، وتوصيف المقايسات مع البروتين.

نزع الأحشاء من الشبكية والسائل الزجاجي ماوس للتحليلات البروتين

الشبكية العصبية على فأرة الحاسوب الذين تتراوح أعمارهم بين 8 أيام هي على رأس 4٪ كتلة الجيلاتين. بعد عزل طبقة مبصرة (200 ميكرون) من خلال vibratome، هي المصنفة مبصرات بعد التفكك الميكانيكية والأنزيمية للثقافة. طبقة مستقبلة للضوء يمكن استخدامها لالجزيئية، التحاليل البيوكيميائية أو الزرع.

Vibratome باجتزاء شبكية العين الفأر لإعداد الثقافات مبصرة

الهدف من هذا البروتوكول هو إظهار تقنية فعالة لعزل اللب الزجاجي الكامل والسليم والقشرة من عيون الخنازير بعد الوفاة.

زجاجي كله فكاهة تشريح لتحليل Vitreodynamic

ويتألف من مناطق متميزة وظيفيا وجزيئيا، بما في ذلك منتظمة، والبقعة، والشبكية الطرفية شبكية العين البشرية. هنا، يمكننا وصف أسلوب استخدام الخزعات لكمه والإزالة اليدوية لطبقات الأنسجة من عين بشرية لتشريح وجمع هذه المناطق الشبكية متميزة لتحليل البروتين المتلقين للمعلومات.

تشريح RPE-المشيمية والشبكية البشرية لتحليل البروتين

توصيف البروتين من أسرة microvascular العين أمر حيوي لفهم متعمق للعديد من أمراض العين في البشر. وتوضح هذه الدراسة طريقة فعالة وسريعة وقوية لاستخراج البروتين وإعداد عينة من الأوعية الدموية الصغيرة التي توظف الشرايين الهدبية الخلفية قصيرة الخنزير كسفن النموذجي لتحليلات الجماهيري-قياس الطيف الكتلي المستندة البروتيوميات.

إعداد نموذج للإعلام-قياس الطيف الكتلي المستندة البروتيوميات تحليل ميكروفيسيلس العين

نحن نصف طريقة لفصل ظهارة الشبكية الصبغية (RPE) بكفاءة عن شبكية العين في عيون الإنسان وتوليد حوامل مسطحة RPE / المشيمية كاملة للتحليلات النسيجية والمورفومترية ل RPE.

توليد فعال ومتسق لظهارة صبغية شبكية العين / المشيمية من العين البشرية للتحليل النسيجي

يقدم هذا البروتوكول منصة مستودع حيوي متكاملة للجمع الموحد والتعليق والبنوك الحيوية للفكاهة المائية البشرية عالية الجودة والخزعات السائلة الزجاجية للتحليلات الجزيئية النهائية ، بما في ذلك البروتينات والأيض والسكريات.

البنوك الحيوية للخزعات السائلة المائية والزجاجية البشرية للتحليلات الجزيئية

تظهر شبكية العين تنظيما مكانيا معقدا عبر هيكلها الرقائقي. تتطلب تقنيات النسخ المكاني والتسلسل المكانية الحديثة أقساما &lt; الأنسجة بسمك 20 ميكرومتر ، مما يحد من قابليتها لتطبيق أبحاث الشبكية. تنتج طريقة التقطيع بالتبريد المجمدة حديثا أقساما رقيقة من شبكية العين مع الحفاظ على العلاقات المكانية المستوية ، مما يتيح رسم خرائط جزيئية شاملة عبر الصفائح.

أون الوجه التقطيع بالتبريد لشبكية العين الفأرية للتحليل الجزيئي المكاني عالي الأبعاد

تصور هذه الطريقة البنية الأصلية لألياف الكولاجين في الجسم الزجاجي باستخدام الفحص المجهري للانعكاس متحد البؤر.

تحضير عيون الخنازير للفحص المجهري للانعكاس متحد البؤر لتصور شبكة ألياف الكولاجين الزجاجي

تعلم تقنيات تشريح الجسم الزجاجي البشري لتحليل البروتين في أبحاث طب العيون. يوضح هذا الفيديو طرق عزل الهيالويد الأمامي وقاعدة الجسم الزجاجي بدقة لضمان سلامة العينات.

تشريح الإنسان عناصر الجسم الزجاجي لتحليل البروتين

استكشف المزيد من الفيديوهات