تنقية الفيروس من السائل السلوي لبيوض الدجاج الملقحة

ابدأ بخزان يحتوي على السائل السلوي الذي تم جمعه من بيض الدجاج المصاب بالفيروس.

يحتوي هذا السائل على جسيمات فيروسية إلى جانب ملوثات مشتقة من المضيف.

مرر السائل عبر مرشح عمق لالتقاط الملوثات الكبيرة مع السماح للملوثات الأصغر والفيروسات بالمرور.

بعد ذلك، يتم تحميل السائل المُرشح في نظام ترشيح، حيث يتدفق بشكل مماسي عبر سطح غشاء.

تمر الملوثات الأصغر حجمًا عبر الغشاء، بينما يتم احتجاز الفيروس وتركيزه.

قم بتحميل الفيروس المركز على تدرج كثافة ثم قم بطرده مركزياً. يشكل الفيروس حزمة مميزة حيث تتطابق كثافته مع التدرج.

قم بجمع النطاق الغني بالفيروس في كاسيت دياليزة وضعه في محلول منظم. تنتشر مكونات التدرج إلى الخارج، بينما ينتشر الماء من المحلول المنظم إلى الداخل عبر الغشاء شبه المنفذ.

بعد ذلك، ضع الكاسيت في محلول عالي التوتر لسحب الماء وتركيز الفيروس المُنقى.

لتنقية فيروس مرض نيوكاسل أو NDV، قم أولاً بتجهيز النظام التجريبي الذي تم إعداده مسبقاً عن طريق تمرير 50 milliliters من PBS من خلاله.

أوقف المضخة عندما يتبقى حوالي 5 milliliters من PBS في الأنبوب. بعد ذلك، قم بتوصيل مرشح عميق (depth filter) بدرجة احتجاز تتراوح من 1 إلى 3 micromolar بالأنابيب. ولتفريغ المرشح من الهواء، قم بإزالة الغطاء الثاني من الجانب القمي لمرشح العمق، ثم ابدأ بتمرير 50 milliliters إضافية من PBS عبر النظام.

بمجرد أن يبدأ محلول PBS