موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 2:08 دقيقة • August 31st, 2026
ابدأ بفأر مخدّر في وضعية الاستلقاء الظهري، مع حلاقة جلد الصدر.
قم بتطهير الجلد المحلوق.
استخدم التصوير بالموجات فوق الصوتية لتصور القلب وتحديد الجدار الخارجي للبطين الأيسر.
استخدم محقنة دقيقة تحتوي على فيروس مأشوب يشفر جيناً اختبارياً يُشتبه في تأثيره على وظائف القلب.
تحت توجيه التصوير بالموجات فوق الصوتية، أدخل الإبرة في جدار البطين.
احقن الفيروس في الطبقة العضلية للجدار.
قم بإجراء حقنة ثانية وثالثة، مستهدفاً مواقع بطينية مختلفة لتحقيق تعبير جيني أوسع.
اسحب الإبرة واترك الفأر ليتعافى.
يرتبط الفيروس بمستقبلات على خلايا العضلات البطينية، مما يحفز عملية الالتقام الخلوي بوساطة المستقبلات ونقل الجينوم الفيروسي إلى النواة.
يؤدي التعبير عن الجينوم الفيروسي إلى تخليق البروتين المشفر.
أصبح نموذج الفأر الآن جاهزاً لتقييم آثار التعبير الجيني المستحث بواسطة الفيروس على وظيفة القلب.
في البداية، قم بتعقيم المنطقة السفلية اليسرى من صدر الفأر المخدر عن طريق جولات متبادلة من الفرك بمحلول قائم على اليود أو الكلورهيكسيدين، ثم الكحول، ثلاث مرات في حركة دائرية. وتحت توجيه التصوير بالموجات فوق الصوتية، أدخل إبرة المحقنة التي تحتوي على الفيروس في صدر الحيوان.
وجه طرف الإبرة نحو الجدار الحر الأمامي للبطين الأيسر واحُقن ببطء من 10 إلى 15 µL من الفيروس. تحقق من نجاح الحقن في صور الموجات فوق الصوتية من خلال زيادة السطوع بالقرب من طرف الإبرة. اسحب الإبرة من القلب وأدخلها في مناطق أخرى من البطين الأيسر لإجراء عملية حقن ثانية وثالثة من نفس كمية الفيروس.