موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 3:42 دقيقة • September 30th, 2026
ابدأ باستخدام خلايا بشرية شبيهة بالخلايا الظهارية.
تحتوي البئر الأولى على خلايا غير منقولة، وتحتوي البئر الثانية على خلايا منقولة بمحاكي microRNA.
في الخلايا التي تم نقل الجينات إليها، ترتبط سلسلة محاكي microRNA بمعقد بروتيني لتكوين معقد إسكات مستحث بواسطة RNA.
قم بإزالة الوسط وأضف المعلق الفيروسي.
قم بالتحضين للسماح بالارتباط الفيروسي.
تخلص من الوسط وأضف وسطاً جديداً، ثم قم بالتحضين.
في الخلايا غير المنقولة، يخضع الفيروس لعملية الالتقام الخلوي بوساطة المستقبلات ويدخل إلى الخلية.
يقوم بتحرير الجينوم الفيروسي الذي يتكاثر وينتج العديد من الجسيمات الفيروسية.
في الخلايا المنقولة جينياً، يتعرف معقد إسكات الحمض الريبي النووي المستحث (RNA-induced silencing complex) على الجينوم الفيروسي، مما يحفز تحلله ويقلل من إنتاج الفيروس.
يتم تحرير فيروسات جديدة. قم بنقل الوسط المحتوي على الفيروس.
قم بإجراء الطرد المركزي لترسيب الحطام وجمع السوائل الطافية المحتوية على الفيروس.
أضف السائل الطافي إلى خلايا غير منقولة جينياً. ثم قم بالتحضين لإحداث العدوى الفيروسية.
تظهر الآبار المعالجة بطافي الخلايا غير المنقولة موتًا خلويًا أعلى، مقارنة بالآبار المعالجة بطافي الخلايا المنقولة بمحاكي microRNA، مما يؤكد تثبيط التضاعف الفيروسي بوساطة microRNA.
في هذه الخطوة، يتم زراعة الخلايا المتقبلة في طبق زراعة أنسجة مكون من 96 بئراً
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية