إصابة الفئران بفيروس هيربس الفئران عن طريق الأنف لتقييم الاستجابات المناعية للمضيف

ابدأ بفأر سليم ومخدر في وضعية تسمح بالتوصيل التنفسي.

يتم إعطاء فيروس الهربس الفأري عن طريق الأنف لبدء العدوى.

ينتقل الفيروس عبر الممرات الهوائية ويصل إلى الرئتين.

داخل الرئتين، يقوم الفيروس بإصابة الخلايا الطلائية الرئوية ويطلق القفيصة النووية (nucleocapsid) الخاصة به.

يدخل الجينوم الفيروسي إلى النواة ويتم نسخه إلى RNA فيروسي.

يتعرف مستشعر سيتوبلازمي في المضيف على الحمض النووي الريبوزي الفيروسي (viral RNA) ويحفز مسارات إشارات تعمل على تنشيط عوامل نسخ محددة. ومن ثم تعزز هذه العوامل التعبير عن جينات السيتوكينات، مما يؤدي إلى إنتاج سيتوكينات مضادة للفيروسات.

بعد العدوى، يتم تشريح الفأر الذي تم القتل الرحيم له واستئصال أنسجة الرئة.

ضع فصاً واحداً من الرئة في أنبوب يحتوي على حبيبات السيليكا وأضف وسط استنبات بارداً.

قم بتجانس النسيج لتمزيق الخلايا وتحرير المكونات الموجودة داخل الخلايا، بما في ذلك السيتوكينات المضادة للفيروسات.

قم بتبريد المتجانس على الثلج، ثم كرر عملية التجنيس لضمان التفكك الكامل للأنسجة.

قم بإجراء الطرد المركزي لترسيب بقايا الخلايا.

اجمع السائل الطافي الذي يحتوي على السيتوكينات المضادة للفيروسات لتقييم الاستجابة المناعية للمضيف تجاه عدوى الفيروس الهيربسي.

قم بتلقيح فئران C57-black-six المخدرة عن طريق الأنف بـ 40 µl تحتوي على 40 PFU من مسبب المرض الفيروسي الطبيعي في الفئران gamma he