موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 3:24 دقيقة • September 30th, 2026
ابدأ باستخدام شبكة مجهر إلكتروني نافذ (TEM) مطلية بالكربون وموضوعة على شريحة زجاجية.
ضع الشريحة داخل غرفة وطبق تفريغاً توهجياً لجعل السطح الكربوني محباً للماء لضمان توزيع العينة بشكل منتظم.
أزل الشريحة، وأمسك الشبكة باستخدام الملاقط ثم ضع عليها معلقاً من جسيمات فيروس التهاب الكبد E (HEV) النانوية.
تتكون هذه الجسيمات النانوية من بروتينات القفيصة المعاد تركيبها لفيروس HEV وتفتقر إلى الأحماض النووية والبروتينات الفيروسية المساعدة.
يتم التحضين للسماح للجزيئات النانوية بالامتزاز على سطح الشبكة. ثم يتم التجفيف باستخدام ورق ترشيح لامتصاص فائض المعلق.
اغسل الشبكة بالماء منزوع الأيونات لإزالة الجسيمات النانوية غير الممتزة، ثم جففها بالتربيت مرة أخرى.
أضف صبغة أسيتات اليورانيل واتركها لفترة وجيزة.
يُشكل أسيتات اليورانيل خلفية كثيفة للإلكترونات حول الجسيمات النانوية، مما يعزز التباين أثناء التصوير باستخدام المجهر الإلكتروني النافذ (TEM).
قم بتجفيف الصبغة الزائدة باستخدام ورق الترشيح، ثم ضع الشبكة في غرفة تجفيف لإزالة الرطوبة.
تحت المجهر الإلكتروني النافذ (TEM)، تظهر جسيمات HEV النانوية كبنيات عشرونية الوجوه، مجوفة ومنتظمة، وتفتقر إلى الأحماض النووية الفيروسية.
قم بتخفيف عينات جسيمات HEV النانوية إلى تركيز يتراوح بين 0.5 و2 mg/mL باستخدام 10 mM من MES، بـ pH 6.2 من أجل التصوير باستخدام TEM. قم بتأيين ال
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية