موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 4:33 دقيقة • September 30th, 2026
خذ صفيحة متعددة الآبار تحتوي على طبقات أحادية من الخلايا الطلائية وأضف معلقاً فيروسياً إلى الآبار.
يتم التحضين مع الرج من حين لآخر لتوزيع الفيروسات بشكل متجانس. ترتبط الفيروسات بالخلايا ثم تدخل إليها.
في بئر واحد، أضف الأغاروز المنصهر، والذي يتصلب ليشكل طبقة تغطية شبه صلبة.
في بئر آخر، أضف طبقة تغطية سائلة لزجة قائمة على السليلوز دقيق التبلور ثم قم بالتحضين. وتعمل لزوجتها على تقييد انتشار الفيروسات، بشكل مشابه لطبقة التغطية شبه الصلبة.
داخل الخلية، يطلق الفيروس جينومه وينتج جزيئات RNA وبروتينات فيروسية جديدة.
تتجمع الفيروسات الجديدة وتخرج من الخلايا وتسبب تحللها.
تُصيب الفيروسات المتحررة الخلايا المجاورة، مما يؤدي إلى تكوين لويحات.
قم بشفط الطبقة السائلة العلوية وأضف مادة مثبتة للحفاظ على الخلايا غير المتحللة.
تخلص من المادة المثبتة وأزل طبقة الأغاروس العلوية.
أضف صبغة تصبغ الخلايا الحية، مع ترك اللويحات غير مصبوغة. بعد ذلك، اغسل الصبغة الزائدة.
تنتج الطبقة السائلة أعداداً من اللويحات قابلة للمقارنة بتلك الناتجة عن الطبقة شبه الصلبة، مما يدعم استخدامها كبديل في مقايسات اللويحات.
في اليوم التالي لعملية الزرع، استخدم مجهراً مقلوباً للتحقق من درجة تلاقي الخلايا وحيويتها قبل البدء في المقايسة. تأكد من أن الخلايا تظهر مورفولوجيا خلوية قياسية وبدرجة تلاقٍ تصل إلى 90% تقريباً.
قم بإجراء تخفيف تسلسلي
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية