نموذج القرنية الخنازير خارج الجسم الحي لالتهاب القرنية الجرثومي: تقنية لإثبات العدوى البكتيرية في الخلايا الظهارية للقرنية

في عين الفقاريات ، تصاب القرنية - الغطاء الواقي الخارجي - ب Pseudomonas aeruginosa ، مما يؤدي إلى حالة التهاب القرنية - التهاب القرنية.

لإنشاء نموذج التهاب القرنية خارج الجسم الحي ، ضع زر القرنية في عين الخنازير في طبق بتري. يتكون هذا الجزء من الأنسجة من القرنية المحاطة ببقايا الصلبة - غطاء العين الليفي. استكمل طبق بتري بوسائط تحتوي على المضادات الحيوية للقضاء على الميكروبات الملوثة من سطح ظهارة القرنية.

حدد موقع الجزء المركزي من القرنية. قم بعمل شقوق أفقية ورأسية سطحية في النمط المطلوب تخترق الطبقة الظهارية الخارجية للقرنية. انقل الأنسجة المقطوعة ، بحيث يكون جانب القرنية لأسفل ، إلى قالب مجوف متخصص.

املأ تجويف القرنية بالأجار المسال واتركه يتصلب ، مما يقيد الأنسجة داخل القالب. اقلب القالب لفضح السطح المصاب لظهارة القرنية. ماصة Pseudomonas معلقة في المناطق المحفورة من القرنية. تراكب القالب بمزيد من وسط النمو للحصول على نمو بكتيري مثالي. استكمل طبق الثقافة بالوسائط واحتضنها.

تجتاز البكتيريا الشق الظهاري لغزو السدى. داخل السدى ، تسبب البكتيريا تسلل الخلايا المناعية والبروتينات والسوائل في القرنية مما يؤدي إلى استجابة التهابية. يزيد تراكم السوائل من عتامة القرنية ، مما يؤكد التهاب القرنية الجرثومي.

قم بإزالة الوسائط من طبق بتري ، واشطف القرنيات مرتين باستخدام ملليلتر واحد من PBS المعق