موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 3:02 دقيقة • July 8th, 2025
يستخدم Microsphere-PCR كرة صغيرة الحجم مقترنة بقليل النوكليوتيدات على سطحها ، مما يتيح التضخيم التفضيلي للحمض النووي أحادي الشريطة.
لبدء تفاعل البوليميراز المتسلسل المجهري ، خذ مزيجا تفاعليا يحتوي على خيوط DNA أحادية الشريطة ، وبادئات أمامية مع علامة نيوكليوتيدات إضافية ، وبوليميراز DNA القابل للحرارة ، و dNTPs ، والكريات المجهرية التي تعرض مجسات قليل النوكليوتيدات أحادية الشريطة.
ضع الأنبوب في جهاز تدوير حراري ، وقم بتشغيله في الظروف المحددة.
في الدورة الأولى ، عند درجة حرارة التلدين ، يرتبط الحمض النووي للقالب بالمسبار الموجود على سطح الكرة المجهرية بحيث يعمل الحمض النووي للقالب كخيط الإحساس. أثناء التمديد ، يمتد البوليميراز إلى الحمض النووي ، ويظل الإرسال المزدوج متصلا بالكرة المجهرية.
في الدورة التالية ، أثناء التمسخ ، ينفصل الحمض النووي للقالب عن الكرة المجهرية ، تاركا خيط المسبار مرتبطا بالسطح - يعمل كقالب لخيط جديد.
أثناء التلدين ، يرتبط التمهيدي الموسوم بخيط مضاد للحساس. في وقت لاحق ، يمدده البوليميراز لتصنيع خيط الإحساس بعلامة النيوكليوتيدات.
كرر الدورة عدة مرات لإنشاء نسخ متعددة من الحمض النووي أحادي الشريطة ، والتي تدخل في المحلول ، بينما تظل الملوثات ذات الشريطة المزدوجة متصلة.
انقل منتجات PCR إلى أنبوب يحتوي على مخزن مؤقت للتحميل. قم بتحميل المنتج والعلامات في آبار مخت
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية