تقنيات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)

يوضح هذا الفيديو دور تفاعل البوليميراز المتسلسل للقطرات الرقمية في تحديد طفرة indel في عينة الحمض النووي. تتيح الدقة العالية والحساسية ل ddPCR الكشف الدقيق والمتسق عن الطفرات النادرة الموجودة في العينة ، حتى عند المستويات المنخفضة. يمكنه تحديد وتحديد طفرات indel في مناطق مختلفة من الجينوم ، مما يوفر رؤى قيمة حول آليات الطفرة والعواقب الوظيفية لهذه الطفرات.

يوضح هذا الفيديو تفاعل البوليميراز المتسلسل المتدرج لتحسين درجة حرارة التلدين للبادئات ، والتي تحدد درجة حرارة التلدين المتدرج على طول الآبار. يتم تحديد تأثير درجات حرارة التلدين المختلفة من خلال إنتاجية المنتجات المضخمة التي تساعد على تحسين حالة التفاعل.

في هذا الفيديو ، نوضح تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل الرقمي المزدوج (ddPCR) - وهو تعديل لتقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل التقليدية المفيدة في اكتشاف علامتين جينيتين مختلفتين في وقت واحد. يتم تقسيم تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل الفردي إلى قطرات مستحلبة بحجم نانولتر يتم تضخيمها بشكل مستقل ، ويستخدم الكشف عن إشارات تضخيم التألق ذات الألوان المختلفة من جزء القطرات لحساب التركيز الأولي للتسلسلات المستهدفة.

يوضح هذا الفيديو طريقة كمية للكشف عن العدوى الفيروسية باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل للنسخ العكسي في الوقت الفعلي. تقوم خطوة النسخ العكسي بتحويل الحمض النووي الريبي إلى الحمض النووي (cDNA) ، والذي يتم تضخيمه بعد ذلك عبر دورات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR). يتم تأكيد وجود الحمض النووي الريبي الفيروسي في العينة من خلال تحليل منحنيات التضخيم والتفكك للحمض النووي التي تم الحصول عليها من تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR).

يصف هذا الفيديو تفاعل البوليميراز المتسلسل المانع من النوع البري ، أو WTB-PCR ، الذي يكتشف الطفرات الجسدية. تستخدم التقنية القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل حمض نووي مغلق ، أو LNA ، وهو قليل النوكليوتيد يرتبط بأليل البري التكميلي ويمنع استطالةه. يسمح الحجب بشكل انتقائي بتضخيم الأليلات الطافرة منخفضة المستوى على متغيراتها البرية في العينة.

في هذا الفيديو ، نناقش تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي ، qPCR ، لتعداد العاثيات T7 من خلال القياس الكمي للحمض النووي. ترتبط الصبغة الفلورية في خليط تفاعل البوليميراز المتسلسل بخيوط الحمض النووي المركبة حديثا وتنبعث منها مضان يتم قياسه.

يصف هذا الفيديو تقنية تضخيم الحمض النووي أحادي الشريطة باستخدام كريات بوليمر مطلية بقليل النوكليوتيدات في تفاعل أحادي الأنبوب. تنتج هذه العملية حمض نووي نقي أحادي الشريطة ، والذي يمكن استخدامه بشكل أكبر لتسلسل الحمض النووي وتحليل المصفوفات الدقيقة.

يصف هذا الفيديو تفاعل البوليميراز المتسلسل المتداخل ، وهي تقنية تتكون من عمليتين متتابعتين لتضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل باستخدام مجموعتين أوليتين. تهدف المجموعة الأولى من الاشعال إلى تلدين التسلسلات في المنبع من المجموعة الثانية ، مما يؤدي إلى تضخيم انتقائي لتسلسلات جينية معينة. يعتبر تفاعل البوليميراز المتسلسل أكثر حساسية وتحديدا من تفاعل البوليميراز المتسلسل العادي ويستخدم على نطاق واسع كتقنية للكشف عن الأمراض المختلفة.

في هذا الفيديو ، نصف تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل الذائب عالية الدقة لتحديد تعدد الأشكال لطول شظايا الحمض النووي بأطوال تسلسل متفاوتة ، بناء على تحليل درجة حرارة الانصهار.

يوضح هذا الفيديو تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل متعدد الإرسال للقياس الكمي المتزامن لمناطق الحمض النووي الميثيلية في مجموعات مختلفة من خلايا الدم البيضاء كمؤشر حيوي مبكر للتشخيص السريري والتشخيص.

يوضح هذا الفيديو فائدة تفاعل البوليميراز المتسلسل الرقمي بتنسيق رقاقة في أنبوب للكشف عن اختلافات النيوكليوتيدات المفردة في عينات الحمض النووي. يتم تقسيم تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل الفردي إلى غرف تعمل كتفاعلات تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل المستقلة ، ويستخدم الكشف عن إشارات التألق من الأهداف المضخمة في الغرف لحساب تردد الأليل المتغير في العينة.

يوضح هذا الفيديو تفاعل البوليميراز المتسلسل الرقمي القائم على الرقاقة - وهو نوع مختلف من تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل الرقمية المفيدة في اكتشاف متغيرات النسخ النادرة. يتم تقسيم تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل إلى غرف رقاقة نانوية ، يعمل كل منها كتفاعل مستقل. يؤكد اكتشاف إشارات التألق من الغرف ذات الأهداف المضخمة وجود متغيرات نادرة في النسخ في العينة.