موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 4:08 دقيقة • July 8th, 2025
تحتوي الخلايا البدينة — خلايا الدم البيضاء المتخصصة، على حبيبات إفرازية غنية بالإنزيمات الليزوزومية، مثل بيتا هيكسوسامينيداز.
لإجراء تحلل الخلايا البدينة - وهي عملية تنطوي على إطلاق حبيبات إفرازية ، ابدأ بصيحة متعددة الآبار تحتوي على تعليق الخلايا البدينة البريتونية الفئرانية المعالج مسبقا بالغلوبولين المناعي.
عالج الخلايا بمادة كيميائية مستهدفة. تتفاعل المادة الكيميائية المستهدفة ذات الجهد المحفز مع الغلوبولين المناعي المرتبط مسبقا على المستقبلات المحددة للخلايا البدينة. هذا ينشط حركة الحبيبات التي تحتوي على بيتا هيكسوسامينيداز إلى سطح الخلية ، وإطلاقها في المحلول.
قم بالطرد المركزي للوحة لحبيبات الخلايا ، ونقل المادة الطافية المحتوية على الإنزيم إلى بئر فارغ من صفيحة جديدة. عالج حبيبات الخلية بمخزن مؤقت للتحلل لتحلل الخلايا وإطلاق محتوياتها في المحللة ، بما في ذلك بيتا هيكسوسامينيداز داخل الخلايا.
أضف المحللة المحتوية على الإنزيم إلى بئر آخر من نفس اللوحة متعددة الآبار. عالج كلا الآئرين بركيزة الإنزيم ، p-nitrophenyl-acetyl-D-glucosamine ، وحتضنها. تقوم الإنزيمات بتحلل الركائز ، وتطلق p-nitrophenol - منتج ملون يجعل المحلول أصفر.
قم بتراكب البئر بمحلول إيقاف قلوي لإنهاء التفاعل وتحويل p-nitrophenol إلى p-nitrophenolate ، مما يؤدي إلى تكثيف اللون الأصفر. يقدر القياس الطيفي امتصاص ا
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية