موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 3:53 دقيقة • July 8th, 2025
خلايا Kupffer هي ضامة مقيمة موضعية في الجيوب الأنفية للكبد تساعد على حماية الكبد من العدوى.
لعزل خلايا الفأر Kupffer ، خذ كبد فأر محصور حديثا في طبق متوسط المحتوى. تهضم خطوة نضح الكبد مع الكولاجيناز المصفوفة خارج الخلية ، مما يتسبب في تفكك خلايا الكبد.
تمزق كبسولة الكبد لإطلاق خلايا الكبد المنفصلة ، بما في ذلك الخلايا المتني ، وأجهزة الكمبيوتر ، والخلايا غير المتني ، والشخصيات غير القابلة للعب ، بما في ذلك خلايا Kupffer والخلايا البطانية والخلايا النجمية وكريات الدم الحمراء المتبقية.
تصفية لإزالة الحطام. قم بإجراء الطرد المركزي التفاضلي منخفض السرعة على المرشح لترسيب أجهزة الكمبيوتر بشكل انتقائي. اجمع المادة الطافية المحتوية على NPC. جهاز طرد مركزي لتركيز الخلايا.
أعد تعليق الخلايا في الوسط والطبقة على تدرج كثافة متساوي التوتر متقطع مع طبقتين من الوسائط المتدرجة ذات الكثافات المختلفة. مع الطرد المركزي ، تنفصل الخلايا بناء على كثافتها بالنسبة إلى وسط التدرج.
اجمع طبقة NPC المخصبة في الطور البيني للطبقة المتدرجة. نقل إلى أنبوب متوسط المحتوية وجهاز طرد مركزي. قم بزرع الشخصيات غير القابلة للعب المعلقة في طبق متعدد الآبار.
في غضون دقائق ، تلتصق خلايا Kupffer المعلقة بسهولة بسطح البئر البلاستيكي ، بينما تظل الشخصيات الأخرى غير القابلة للعب في الوسط. استبدل الوسط بوسط جديد لدعم نمو خلايا
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية