عزل وتنقية الخلايا البائية من الدم المحيطي البشري

لإجراء الفصل السلبي المناعي للخلايا البائية ، اجمع الدم المحيطي البشري في أنبوب يحتوي على مضادات التخثر لمنع تخثر الدم. أضف خلايا الدم الحمراء ، كرات الدم الحمراء ، المخزن المؤقت للتحلل لتحلل كرات الدم الحمراء دون التأثير على خلايا الدم الأخرى.

جهاز طرد مركزي لترسيب خلايا الدم السليمة والأكثر كثافة من كرات الدم الحمراء الأقل كثافة ، والتي تبقى في المادة الطافية. تخلص من المادة الطافية. أعد تعليق الحبيبات في وسط طازج.

انقل الخلايا إلى لوحة ثقافة. احتضان للسماح للبلاعم والخلايا الوحيدة بالالتصاق باللوحة بينما تظل الخلايا غير الملتصقة ، بما في ذلك الخلايا البائية ، معلقة.

اجمع الخلايا المعلقة في أنبوب جديد. جهاز طرد مركزي لتكسير الخلايا وإعادة تعليقها في مخزن مؤقت.

أضف محلول كوكتيل يحتوي على أجسام مضادة بيوتينيل خاصة بخلايا الدم بخلاف الخلايا البائية. ترتبط الأجسام المضادة بالمستضدات الموجودة على سطح الخلايا غير البائية ، تاركة الخلايا البائية غير مسماة.

الطرد المركزي. تخلص من المادة الطافية التي تحتوي على أجسام مضادة غير مرتبطة.

أضف محلول من الخرز المغناطيسي المترافق بالستربتافيدين. أثناء الحضانة ، يرتبط الستربتافيدين الموجود على الميكروبيدات بإحكام بالأجسام المضادة الحيوية المرتبطة بالخلايا غير البائية ، وتشكل مجمعات.

ضع الأنبوب في مجال مغناطيسي للصق الخلايا غير البائية المرتبطة بال