فرز الخلايا القائم على قياس التدفق الخلوي لمجموعات مختلفة من الخلايا البائية في الدورة الدموية

0 views • 3:01 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

بناء على مستقبلاتها على سطح الخلية ، تصنف الخلايا البائية البشرية المنتشرة على أنها خلايا بائية ساذجة إيجابية CD19 ، وخلايا ذاكرة بائية إيجابية CD19 و CD27 ، وخلايا بلازما بلازما CD19 و CD27 و CD38 الإيجابية.

لفرز مجموعات الخلايا هذه ، خذ معلق الخلايا البائية المنقى. احتضان بالأجسام المضادة للجلوبولين المناعي البشري G. تمنع الأجسام المضادة مستقبلات Fc للخلايا البائية ، مما يمنع ارتباط الأجسام المضادة غير المحددة.

أضف الأجسام المضادة ذات العلامات الفلورية التي تستهدف CD19 و CD27 و CD38.

ترتبط الأجسام المضادة ل CD19 بمستقبلات CD19 التي يتم التعبير عنها في كل مكان على الخلايا البائية.

ترتبط الأجسام المضادة ل CD27 بمستقبلات CD27 المعبر عنها في خلايا الذاكرة B وخلايا البلازما البلازما.

ترتبط الأجسام المضادة ل CD38 بمستقبلات CD38 المعبر عنها في خلايا بلازما البلازما.

أضف صبغة ملزمة للحمض النووي الفلوري كعلامة خلية ميتة.

تظهر الخلايا الميتة فقدانا لسلامة الغشاء ، مما يسمح بالدخول الخلوي للصبغة والارتباط بالحمض النووي المزدوج الذي تقطعت به السبل ؛ تظل الخلايا الحية غير ملوثة.

جهاز طرد مركزي لإزالة الأجسام المضادة والأصباغ غير المرتبطة وإعادة تعليق الخلايا في مخزن FACS. قم بتصفية الخلايا من خلال مصفاة للحصول على تعليق متجانس والقضاء على التكتلات.

باستخدام مقياس التدفق الخلوي ، قم بفرز الخلايا الميتة من الخلايا الحية. داخل الخلايا الحية ، يميز تعبير CD19 و CD27 و CD38 الخلايا البائية الساذجة وخلايا الذاكرة B وخلايا البلازما البلازما.

بعد إجراء حجب غير محدد ، أضف 1 ميكروغرام من كل جسم مضاد للاختيار لكل 1 × 106 خلايا إلى الأنبوب مع خلط لطيف لمدة 30 دقيقة على الجليد. خلال الدقائق الخمس الأخيرة من الحضانة ، أضف 5 ميكرولتر من 7-AAD إلى الخلايا. ثم أضف 2 مل من PBS الطازج إلى الخلايا ، ودوامة قبل الطرد المركزي.

أعد تعليق الحبيبات في مخزن مؤقت للفرز الطازج بتركيز 1 إلى 5 × 107 خلايا لكل مليلتر ، وقم بتصفية الخلايا من خلال مصفاة خلية 40 ميكرون في أنبوب بوليسترين جديد سعة 5 ملليلتر. بعد ذلك ، قم بفرز الخلايا عن طريق قياس التدفق الخلوي إلى ثلاثة أنابيب سعة 15 مليلتر تحتوي على 5 ملليلتر من وسط RPMI الطازج لجمع الخلايا البائية الساذجة وخلايا الذاكرة B وخلايا البلازما البلازما.

11:06

على نطاق الجينوم التحوير بوساطة "تحليل المانع هداك" ميكرورناس ومرناس في "ب الخلايا التي يسببها" للخضوع تبديل فئة جزئ الحمض النووي وتمايز خلية البلازما

Related Videos

0 Views

08:25

كشف اللاعبين الرئيسيين من الحصانة Humoral: متقدم ومحسن اللمفاويات العزلة البروتوكول من بقع الفاري بير في

Related Videos

0 Views

08:25

تدفق توصيف القياسات الخلوية من مورين B تطوير الخلية

Related Videos

0 Views

15:29

تنقية سكان خلية معينة من قبل الإسفار الفرز الخلية المنشط (FACS)

Related Videos

0 Views

09:53

تحلل الدم ميكروفلويديك الآلي بروتوكول لتخصيب اعارة خلايا الأنوية

Related Videos

0 Views

04:57

مقايسة قياس التدفق الخلوي لتحديد المجموعات الفرعية للخلايا المناعية في خلايا الدم المحيطية أحادية النواة

Related Videos

0 Views

08:01

مضان تنشيط الفرز الخليوي لتنقية الخلايا الجذعية بلازماوية الشكل من الفأر نخاع العظم

Related Videos

0 Views

11:08

تحليل معلقات خلية معزولة من الأنسجة الصلبة من قبل الطيفي التدفق الخلوي

Related Videos

0 Views

09:34

اتباع نهج خلية واحدة اندماجي لتوصيف الجزيئية والتغاير إيمونوفينوتيبيك الجذعية البشرية والسكان السلف

Related Videos

0 Views

14:30

الفينوتينوبينج المناعي وفرز الخلايا من MKs الإنسان من المصادر الأولية البشرية أو المتمايزة في المختبر من السلف الهيماتوبويات

Related Videos

0 Views

Last updated: 4 July 2026