موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 3:01 دقيقة • July 8th, 2025
بناء على مستقبلاتها على سطح الخلية ، تصنف الخلايا البائية البشرية المنتشرة على أنها خلايا بائية ساذجة إيجابية CD19 ، وخلايا ذاكرة بائية إيجابية CD19 و CD27 ، وخلايا بلازما بلازما CD19 و CD27 و CD38 الإيجابية.
لفرز مجموعات الخلايا هذه ، خذ معلق الخلايا البائية المنقى. احتضان بالأجسام المضادة للجلوبولين المناعي البشري G. تمنع الأجسام المضادة مستقبلات Fc للخلايا البائية ، مما يمنع ارتباط الأجسام المضادة غير المحددة.
أضف الأجسام المضادة ذات العلامات الفلورية التي تستهدف CD19 و CD27 و CD38.
ترتبط الأجسام المضادة ل CD19 بمستقبلات CD19 التي يتم التعبير عنها في كل مكان على الخلايا البائية.
ترتبط الأجسام المضادة ل CD27 بمستقبلات CD27 المعبر عنها في خلايا الذاكرة B وخلايا البلازما البلازما.
ترتبط الأجسام المضادة ل CD38 بمستقبلات CD38 المعبر عنها في خلايا بلازما البلازما.
أضف صبغة ملزمة للحمض النووي الفلوري كعلامة خلية ميتة.
تظهر الخلايا الميتة فقدانا لسلامة الغشاء ، مما يسمح بالدخول الخلوي للصبغة والارتباط بالحمض النووي المزدوج الذي تقطعت به السبل ؛ تظل الخلايا الحية غير ملوثة.
جهاز طرد مركزي لإزالة الأجسام المضادة والأصباغ غير المرتبطة وإعادة تعليق الخلايا في مخزن FACS. قم بتصفية الخلايا من خلال مصفاة للحصول على تعليق متجانس والقضاء على التكتلات.
باستخدام مقياس التدفق الخلوي ، قم بفرز الخلا
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية