موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 4:20 دقيقة • July 8th, 2025
الخلايا البائية التي تفرز الأجسام المضادة ، أو ASCs هي خلايا بائية متمايزة تفرز أنماطا متشاوية للأجسام المضادة ، بما في ذلك IgG و IgM ، لضمان الحماية من مسببات الأمراض.
لإجراء تقييم وظيفي ل ASCs في المختبر ، ابدأ باختبار بقعة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم. خذ لوحة ELISpot تحتوي على غشاء فلوريد بولي فينيلدين منشط في القاعدة.
احتضان الآبار بشظايا الأجسام المضادة متعددة النسيلة التي تحتوي حصريا على مناطق Fab بدون منطقة Fc للجسم المضاد. تحتوي كل منطقة من مناطق فاب على موقع ربط لأنماط تماثلية محددة للأجسام المضادة - IgG أو IgM ، مما يتيح تحديد كلا النمطين المتماثلين.
أثناء الحضانة ، تلتصق شظايا الجسم المضاد بالغشاء ، مما يؤدي إلى الشلل.
تراكب الآبار بمحلول مانع لمنع الارتباط غير المحدد. قم بزرع اللوحة بالخلايا البائية المنشطة التي تفرز الأجسام المضادة ، واحتضنها. تفرز ASCs أنماطا متماثلة مختلفة ، بما في ذلك IgG و IgM ، والتي ترتبط بشظايا الأجسام المضادة المرتبطة بالغشاء.
اغسل اللوحة بمخزن مؤقت لإزالة الأجسام المضادة المفرزة غير المرتبطة. عالج بعض الآبار بأجسام مضادة للكشف المترافق بالإنزيم ل IgM والبعض الآخر بالأجسام المضادة للكشف عن IgG ، واحتضانه.
ترتبط الأجسام المضادة للكشف بالأنماط المتماثلة الخاصة بها ، وتشكل مجمعات مناعية.
أضف ركائز لونية إلى جميع الآبار ، والتي تتفاعل مع الإنزي
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية