موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 3:18 دقيقة • July 8th, 2025
لعزل الخلايا التائية - خلايا الدم البيضاء الضرورية لجهاز المناعة - باستخدام فرز الخلايا المنشطة بالطفو ، BACS ، خذ تعليقا من خلايا الدم المحيطية أحادية النواة ، PBMCs. تحتوي PBMCs على خلايا تائية مستهدفة وخلايا غير مستهدفة مثل الخلايا البائية والخلايا الوحيدة والخلايا القاتلة الطبيعية والخلايا المتغصنة.
أضف عازلة تحتوي على كمية كافية من الجسم المضاد للمضادات المضادة ل CD3 البيوتينيل واحتضانها للمدة المطلوبة. يرتبط الجسم المضاد بمركب CD3 - وهو مركب بروتين متعدد المستويات على سطح الخلية - وهو سمة مميزة للخلايا التائية.
أضف فقاعات دقيقة وظيفية - جزيئات كروية صغيرة مغطاة بالستربتافيدين - للاختيار الإيجابي للخلايا التائية المرتبطة بالأجسام المضادة. جوهر كل فقاعة صغيرة عبارة عن كرة مجوفة ، مما يجعلها جزيئات منخفضة الكثافة قادرة على الطفو في محلول مائي.
احتضان الخليط تحت التحريك ، مما يسمح للفقاعات الدقيقة والعينة بالاختلاط جيدا. أثناء الحضانة ، يرتبط الستربتافيدين الموجود على الفقاعة الدقيقة بالبيوتين على الجسم المضاد المرتبط بالخلايا التائية ، مما يؤدي إلى شل حركة الخلايا الموجودة على الفقاعات الدقيقة.
الطرد المركزي الأنبوب. تنفصل الخلايا غير المستهدفة عن الخليط على شكل حبيبات في الأسفل.
تظل الفقاعات الدقيقة المرتبطة بالخلايا التائية المستهدفة واقفة على قدميها على السطح ، مما يؤدي إلى ف
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية