عزل الخلايا القاتلة الطبيعية عن أنسجة الكبد للتوسع الانتقائي

لعزل الخلايا القاتلة الطبيعية ، أو الخلايا القاتلة الطبيعية - خلايا الدم البيضاء المتخصصة المشاركة في المناعة الفطرية ، ابدأ بأنسجة الكبد البشرية التي تحتوي على مجموعات خلايا متنوعة ، بما في ذلك الخلايا المحتوية على الدهون ، وكريات الدم الحمراء ، والخلايا الحبيبية ، والخلايا الليمفاوية ، والخلايا الليمفاوية الأخرى المحاصرة داخل مصفوفة خارج الخلية الغنية بالكولاجين أو ECM.

افرم الأنسجة إلى قطع صغيرة وانقلها إلى أنبوب يحتوي على الكولاجيناز — إنزيم محلل للبروتين. يشق الكولاجيناز الكولاجين ويعطل المصفوفة ويخفف الخلايا المرتبطة ب ECM.

أدخل الأنبوب في جهاز فصل الأنسجة. يؤدي هذا التفكك الميكانيكي إلى تفكيك ECM لإطلاق خلايا متصلة بشكل فضفاض في المحلول. قم بتصفية المحتويات لإزالة الأنسجة غير المهضومة وشظايا ECM وجمع المرشح الذي يحتوي على خلايا مختلفة.

أعد تعليق الخلايا في مخزن مؤقت يحتوي على بولي فينيل بيروليدون أو حبات السيليكا المطلية ب PVP. ترتبط حبات PVP بشكل انتقائي بالخلايا المحتوية على الدهون ، مما يفصلها بشكل فعال عن بقية الخلايا.

جهاز الطرد المركزي بسرعة منخفضة لتكسير مجموعة الخلايا ؛ تخلص من المادة الطافية التي تحتوي على الحطام والخلايا الدهنية المرتبطة بالخرز. أعد تعليق الحبيبات وتراكب معلق الخلية على أنبوب يحتوي على وسط تدرج الكثافة لفصل الخلايا بناء على كثافتها.

جهاز طرد مركزي