التعرف على علامة القرص المضغوط للخلايا القاتلة التي يسببها السيتوكينات البشرية عن طريق قياس التدفق الخلوي

الخلايا القاتلة التي يسببها السيتوكين ، CIK ، هي مجموعات خلايا مناعية غير متجانسة يتم إنشاؤها خارج الجسم الحي من مزارع الخلايا أحادية النواة في الدم المحيطي (PBMC) المحفزة بسيتوكينات محددة وأجسام مضادة وحيدة النسيلة. تتكون خلايا CIK من مجموعات الخلايا ، بما في ذلك خلايا CD3 + CD56 + NK-T ، وخلايا CD3 + CD56- T ، وخلايا CD3-CD56 + NK.

لتحديد نسبة خلية CIK ، ابدأ بأنابيب تحتوي على تعليق خلية CIK المشتق من PBMC. أضف الأجسام المضادة المضادة ل CD3 و CD56 المترافقة مع الفلوروفورات المختلفة وخلوطها إلى أنابيب معينة. أضف الأجسام المضادة للتحكم في النمط المتماثل المترافقة مع الفلوروفورات المماثلة كأجسام مضادة محددة في أنابيب أخرى.

تتعرف الأجسام المضادة المضادة ل CD3 والمضادة ل CD56 المصنفة بالفلورسنت على CD3 و CD56 المعبر عنها على مجموعات خلايا CIK ، على التوالي. تفتقر الأجسام المضادة للتحكم في النمط المتماثل إلى خصوصية المستضد المستهدف ، مما يسهل قياسات إشارة الخلفية غير المحددة.

خلايا الماصة في أنابيب مستديرة القاع مع أغطية مصفاة خلوية تساعد في إزالة مجاميع الخلايا. قم بتحميل الأنابيب في دائري لمقياس التدفق الخلوي. أثناء الجري ، تمر كل خلية عبر القناة وتواجه أشعة الليزر ، مما يؤدي إلى تشتيت الضوء.

يقيس أحد الكاشفات شدة الضوء المتناثر إلى الأمام ، مما يدل على حجم الخلية ؛ يقيس آخر شدة الضو