اختبار لتحديد إفراز الإنترفيرون جاما في الأعضاء اللمفاوية الفئرانية

إنترفيرون جاما ، أو IFN-γ ، وهو سيتوكين تفرزه الخلايا التائية للخلايا الليمفاوية والخلايا القاتلة الطبيعية أو الخلايا القاتلة الطبيعية ، يتوسط الاستجابة المناعية ضد مسببات الأمراض.

لدراسة إنتاج IFN-γ في الموقع ، خذ فأرا مزروعا بخلايا تائية ذات علامة فلورية مصممة للتعبير عن مستقبل يتعرف على البيضاوي - مستضد نموذجي.

خذ معلقا من البكتيريا المسببة للأمراض — معدل وراثيا لشفط البيضا الألبومي — وحقنها عن طريق الوريد في الفأر، مما يتسبب في عدوى جهازية. تصل البكتيريا المنتشرة إلى الطحال - وهو عضو ليمفاوي ثانوي - مما يساعد على إزالة مسببات الأمراض عن طريق تسهيل التفاعل مع الخلايا المناعية.

تبتلع الخلايا العارضة للمستضد البكتيريا وتعرض المستضد. ترتبط الخلايا التائية بالمستضد عبر مستقبلاته ، ويتم تنشيطها ، وتنتج IFN-γ.

تطلق خلايا البلاعم المصابة بالبكتيريا وسطاء مناعيين وتنظم الروابط المنشطة على سطحها. عند التفاعل مع هذه الإشارات ، يتم تنشيط الخلايا القاتلة الطبيعية وإنتاج IFN-γ.

حقن مثبط نقل البروتين داخل الخلايا لتقييد إفراز IFN-γ ، مما يتسبب في تراكمه داخل الخلايا.

حصاد طحال الفأر. ثبت الأنسجة وتجميدها للمساعدة في التقسيم. باستخدام ميكروتوم التبريد ، قم بإنشاء أقسام رقيقة من الأنسجة ، وضعها على شرائح زجاجية. أضف الأجسام المضادة الخاصة بالخلايا القاتلة الطبيعية ، والتي ترتبط بعلامات السطح ،