التصور داخل الحيوية للخلايا الليمفاوية داخل الظهارة في دلتا جاما

الخلايا الليمفاوية داخل الظهارة من دلتا جاما ، γδ IELs ، هي خلايا تائية مهاجرة متخصصة تعبر عن مستقبلات الخلايا التائية جاما دلتا. توجد هذه الخلايا في الغالب داخل ظهارة الأمعاء وتقوم بدوريات في الظهارة للحد من انتقال مسببات الأمراض عبر الأمعاء.

لتصور γδ IELs داخل كائن حي ، ابدأ بفأر معدلة وراثيا مخدر مع أمعاء دقيقة مكشوفة جزئيا. يتم تعديل الفأر المعدل وراثيا للتعبير عن بروتينات المراسل - بروتينات الفلورسنت الخضراء المحسنة - حصريا في γδ IELs ، مما يتيح تتبعها.

باستخدام الكي الكهربائي ، قم بإنشاء خط ثقب فوق الأمعاء الدقيقة المكشوفة على طول السطح المعوي ، مما يمنع النزيف المفرط.

قم بعمل شق طولي فوق خط الانثقاب لكشف الغشاء المخاطي للأمعاء، مع إظهار نتوءات متعددة تشبه الأصابع — الزغابات. تحتوي كل زغابات على خلايا ظهارية مع مقيم γδ IELs تبرز في تجويف الأمعاء.

ضع الفأر مع سطح الغشاء المخاطي المكشوف مباشرة على اتصال مع صبغة الفلورسنت ، مما يضفي مضان أحمر على التجويف.

صور الماوس تحت المجهر متحد البؤر. حدد موقع الزغابات والصورة في مستويات بؤرية مختلفة على طول المحور z ، بدءا من ظهارة طرف الزغابات. اجمع بين هذه الأقسام البصرية لإنتاج صورة ثلاثية الأبعاد.

يظهر التصوير داخل الحيوية الحركة الديناميكية للفلورة الخضراء γδ IELs على طول الغشاء القاعدي للخلية الظهارية بالقرب من التجويف الأحمر.

ضع زوجي