تقنية لعزل الخلايا البدينة الأولية من تجويف الفئران البريتوني

تلعب الخلايا البدينة - خلايا الدم البيضاء التي تحتوي على حبيبات سيتوبلازمية مليئة بالوسطاء الالتهابيين - دورا رئيسيا في الاستجابات المناعية الفطرية والتكيفية.

لعزل الخلايا البدينة من نوع النسيج الضام من التجويف البريتوني — مساحة مملوءة بالسوائل تؤوي أعضاء البطن — خذ فأرا مرحما مثبتا في وضع ضعيف. قم بعمل شق طولي حتى القص ، مع تعريض جدار البطن.

يقع التجويف البريتوني تحت جدار البطن ، ويحتوي على سائل يؤوي العديد من الخلايا المناعية بما في ذلك الضامة والخلايا الليمفاوية والكريات البيض متعددة الأشكال والخلايا البدينة.

لعزل الخلايا عن طريق الغسيل البريتوني - شفط المحتويات داخل الصفاق - قم بحقن وسط نمو مثلج في التجويف البريتوني دون ثقب الأعضاء ، وتجنب تسرب الدم. يساعد الوسط البارد في الحفاظ على صلاحية الخلية.

هز الماوس بعناية لمدة كافية ، واخلط الخلايا المناعية مع الوسط. أدخل حقنة فارغة في التجويف. شفط الوسط ببطء - لاستعادة معظم السائل المحقون للحصول على عائد خلوي أفضل.

انقل تعليق الخلية إلى أنبوب تجميع. أجهزة الطرد المركزي لترسيب الخلايا كبيليه. تخلص من المادة الطافية. أعد تعليق الحبيبات في وسط مناسب.

قم بوضع الخلايا على الألواح واحتضانها في ظروف فسيولوجية ، مما يسمح للخلايا بالالتصاق بوعاء الاستزراع. أضف السيتوكينات المحددة التي ترتبط بمستقبلاتها على الخلايا البدينة ، مما يؤدي إلى تكاثر