العزل المغناطيسي للخلايا الدبقية الصغيرة من أدمغة جرو الفأر

تعبر الخلايا الدبقية الصغيرة - الضامة المقيمة في الدماغ - عن CD11b ، وهو إنتجرين على سطح الخلية.

لعزل الخلايا الدبقية الصغيرة من أدمغة جرو الفأر ، خذ شظايا المخ في أنابيب تفكك تحتوي على عازلة مع غراء ، وإنزيم محلل للبروتين ، ومنقوص الأكسجين ريبونوكلياز.

ضع الأنابيب على جهاز فرز ميكانيكي. أثناء الجري ، يعطل المنفصل الأنسجة ميكانيكيا.

يهضم غراء المصفوفة خارج الخلية للأنسجة ، ويطلق الخلايا ، بما في ذلك الخلايا الدبقية الصغيرة ، في حالة تعليق. يحلل ديوكسيربونوكلياز الحمض النووي الحر في المعلق ، مما يمنع عزل الخلايا غير الفعال.

الطرد المركزي. أكمل التفكك الميكانيكي عن طريق سحب العينات. انقل المعلق من خلال مصفاة خلية لإزالة الحطام وكتل الخلايا ، والحصول على مجموعة متجانسة من خلية واحدة.

احتضان مع الميكروبيدات المغناطيسية الفائقة التي تعمل بالأجسام المضادة ل CD11b. ترتبط الميكروبيدات على وجه التحديد ب CD11b على الخلايا ، بما في ذلك الخلايا الدبقية الصغيرة.

ما بعد الحضانة ، جهاز الطرد المركزي. قم بإزالة المادة الطافية التي تحتوي على حبات غير مقيدة. إعادة تعليق الخلايا في المخزن المؤقت. قم بالتحميل على عمود يوضع على فاصل مغناطيسي. يتكون العمود من مصفوفة مع حبات مغناطيسية.

عند وضعها على الفاصل ، تعمل الكرات الموجودة داخل العمود على تضخيم المجال المغناطيسي ، وتحتفظ بخلايا CD11b + المرتبطة بال